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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司資料大小
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56次產(chǎn)品名稱:胰蛋白酶抗原修復(fù)試劑盒
規(guī) 格:2×100ml
用 途:抗原修復(fù)緩沖液
注意事項(xiàng):主要由H2O2-甲醇溶液、胰蛋白酶修復(fù)液組成。
儲(chǔ)存條件:—20℃,12個(gè)月
簡(jiǎn)介:組織在制作過(guò)程中,由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過(guò)程中不能將其顯示出來(lái),為了解決上述的問(wèn)題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來(lái)或修正過(guò)來(lái)的過(guò)程稱為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA或Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來(lái),同時(shí)又不會(huì)對(duì)抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準(zhǔn)確率。在熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)法出現(xiàn)之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶等酶類的誘導(dǎo)的表位修復(fù)是最chang用的方法。
胰蛋白酶抗原修復(fù)試劑盒能暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理,抗原修復(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí),可考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。按照每個(gè)片子需要10ml抗原修復(fù)液(1×)計(jì)算,100ml抗原修復(fù)液可以用于10個(gè)樣本的抗原修復(fù)。
組成:
試劑(A):胰蛋白酶溶液 100ml -20℃
試劑(B):TB漂洗液 100ml RT
使用說(shuō)明書(shū) 1份
自備材料:
1、系列乙醇
2、雙蒸水或去離子水
3、加熱設(shè)備
4、免疫染色洗滌液
操作步驟(僅供參考):
(一)石蠟切片
1、脫蠟至水
①二甲苯3次,每次3~5min。
②無(wú)水乙醇脫水2次,每次3~5min。
③95%的乙醇,3~5min。
④90%的乙醇,3~5min。
⑤80%的乙醇,3~5min。
⑥70%的乙醇,3~5min。
⑦蒸餾水沖洗2次,每次3~5min。
2、抗原修復(fù):將切片浸泡在胰蛋白酶溶液中,孵育10~25min。
3、TB漂洗液洗滌1~2次,自來(lái)水洗滌,每次3~5min,*漂洗干凈。
4、進(jìn)行后續(xù)的免疫染色步驟。
(二)冰凍切片:
1、免疫染色洗滌液或自來(lái)水洗滌切片5min。
2、抗原修復(fù):將切片浸泡在胰蛋白酶溶液中,孵育10~25min。
3、TB漂洗液洗滌1~2次,自來(lái)水洗滌,每次3~5min,*漂洗干凈。
4、進(jìn)行后續(xù)的免疫染色步驟。
(三)其它樣品:其它樣品參考石蠟切片或冰凍切片進(jìn)行操作。
注意事項(xiàng):
1、胰蛋白酶溶液恢復(fù)至室溫后再使用,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、浸泡在胰蛋白酶溶液中,最佳孵育時(shí)間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索。
3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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