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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)試劑注意事項(xiàng)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程:在合成過程中,硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨,再由氨轉(zhuǎn)化氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其他含氮化合物;在分解代謝過程中,硝酸鹽戒亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。能使硝酸鹽還原的細(xì)菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物。

硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)試劑主要由對(duì)氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液組成,主要用于鑒別腸桿菌、假單胞菌等。大腸埃希菌等細(xì)菌僅能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,亞硝酸鹽與乙酸作用生成亞硝酸,亞硝酸鹽與試劑中的對(duì)氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸,后者與α-萘胺結(jié)合生成紅色產(chǎn)物;假單胞菌、沙雷菌等細(xì)菌能使硝酸鹽戒亞硝酸鹽還原為氮戒氧化氮,
該作用被稱為脫硝化戒脫氮化作用,產(chǎn)生氣泡,但無紅色出現(xiàn)。

產(chǎn)品組成:
試劑(A): 對(duì)氨基苯磺酸溶液  50ml RT 避光
試劑(B):  α-萘胺溶液 50ml RT 避光
試劑(C):  鋅粉  5g RT
使用說明書  1份

自備材料:
1、 硝酸鹽培養(yǎng)基
2、 恒溫培養(yǎng)箱
3、 試管

操作步驟 (僅供參考) :
1、 被檢細(xì)菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基,35℃培養(yǎng) 1~4 天。
2、 取適量的對(duì)氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液等量混合后即為硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)試劑。
3、 取 0.1ml 硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)試劑,加入培養(yǎng)基中,立即觀察結(jié)果。
4、 如果實(shí)驗(yàn)呈陰性反應(yīng),在試管中加入少許鋅粉,立即觀察結(jié)果。

染色結(jié)果:
未加鋅粉呈紅色陽性(腸桿菌科細(xì)菌、韋榮球菌)
加鋅粉呈紅色  陰性
加鋅粉不變色  假陰性(假單胞菌、沙雷菌等)
注意:加入試劑無顏色反應(yīng),可能原因:1、硝酸鹽沒有被還原,實(shí)驗(yàn)確為陰性;2、硝酸鹽被還原為氨和氮等其他物質(zhì),迚而導(dǎo)致假陰性。這時(shí)可加入少許鋅粉,如出現(xiàn)紅色則說明實(shí)驗(yàn)確為陰性,如果未出現(xiàn)紅色則說明實(shí)驗(yàn)為假陰性。

注意事項(xiàng):
1、 如果要檢查是否有氮?dú)猱a(chǎn)生,可在培養(yǎng)管內(nèi)加一個(gè)小倒管,看有無氣泡產(chǎn)生。
2、 取細(xì)菌培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)注意自我防護(hù)。
3、 待檢細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間也會(huì)影響染色,陽性菌培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)戒已死亜戒細(xì)菌溶解,都常呈陰性反應(yīng)。
4、 某些厭氧菌(韋榮球菌)亦呈陽性反應(yīng)。
5、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效。

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