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一氧化氮合酶染色液實驗步驟

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產(chǎn)品名稱:一氧化氮合酶染色液
儲存條件:4℃,避光,6個月
規(guī)格:5×20ml/5×50ml
用途:一氧化氮合酶染色,也稱作NOS染色液
注意事項:主要由四氮唑藍孵育液、陰性對照組成。染色后酶活性部位呈藍色沉淀。

產(chǎn)品簡介:
細胞中的左旋精氨酸和氧在一氧化氮合酶(Nitxic oxide synthase,NOS)的作用下生成一氧化氮和瓜氨酸。還原型輔酶Ⅱ(NADPH)是一氧化氮合酶的輔酶,可將底物脫氫,然后將氫傳遞給硝基四氮唑藍(NBT),NBT會被還原成藍黑色沉淀,該沉淀部位即為NADPH所在部位即NOS部位。
一氧化氮合酶染色液由磷酸鹽緩沖、漂洗、孵育、復(fù)染等步驟,可用于組織冰凍切片染色,尤其適用于腦組織冰凍切片染色,亦可用于細胞爬片、細胞涂片染色。該染色液僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:
1、30%蔗糖
2、4%多聚甲醛
3、濕盒、恒溫箱、顯微鏡

染色結(jié)果:
NOS部位   藍黑色
背景   紅色(中性紅)或淡藍色

注意事項:
1、應(yīng)選擇恰當(dāng)?shù)墓潭ㄒ骸⒐潭ǚ椒?、固定時間,否則會影響酶的活性。
2、中性紅復(fù)染可以更好的顯示細胞輪廓,有助于進一步計數(shù)陽性細胞率。
3、組織切片染色時,可見NOS神經(jīng)元,類似于Golgi銀染,胞體、神經(jīng)纖維、纖維末梢均可著色。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:6個月有效。

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