中文名稱：酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)
規(guī)格：2×50ml
分類(lèi)：酶類(lèi)染色
儲(chǔ)存方式：4℃,避光,6個(gè)月
產(chǎn)品用途：細(xì)胞和組織的酸性磷酸酶染色
注意事項(xiàng)：主要由萘酚、六氮化對(duì)品紅、亞硝酸鈉等組成,染色后酶活性部位呈紅色。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，所以常作為溶酶體標(biāo)志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi)。各種動(dòng)物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH 為4.5～5.5。酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)以萘酚AS-BI 為底物，在酸性pH 下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。對(duì)某些酸性磷酸酶來(lái)講，Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類(lèi)也都是抑制劑，Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細(xì)胞涂片、冰凍切片等，亦可用于石蠟切片。

自備材料：
1、 蒸餾水、恒溫箱
2、 載玻片、推玻片
3、 光學(xué)顯微鏡

操作步驟 (僅供參考)：
(一)血液、細(xì)胞涂片：
1、 推片：取新鮮血液或骨髓涂片置于載坡片上，推玻片于載玻片保持30度，置于血液或細(xì)胞滴液
的正前方，稍往后移與血液或細(xì)胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開(kāi)，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)
向前滑動(dòng)至鋪滿血膜為止。
2、 自然晾干，ACP固定液4°C固定30s～3min，多數(shù)情況下30～60s即可。
3、 水洗，稍微晾干(不易過(guò)分干燥)。
4、 切片入ACP 孵育液，置于37°C溫箱，避光浸染45～60min，水洗。
5、 復(fù)染：蘇木素染色液染色5min或甲基綠染色液染色2～3min。
6、 水洗、晾干、鏡檢。

(二)冰凍切片：
1、 冰凍切片回溫至37°C，水中浸泡1～2min。
2、 自然晾干，ACP固定液4°C固定1～3min。
3、 水洗，稍微晾干(不易過(guò)分干燥)。
4、 切片入ACP孵育液，置于37°C溫箱，避光浸染45～60min，水洗。
5、 復(fù)染：蘇木素染色液染色5～8min或甲基綠染色液染色2～3min。
6、 水洗、晾干、鏡檢。

(三)石蠟切片：
1、 石蠟切片脫蠟5～10min，重復(fù)一次。
2、 無(wú)水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min。
3、 水洗2min。
4、 自然晾干，ACP 固定液4°C固定30s～3min，多數(shù)情況下30～60s即可。
5、 水洗，稍微晾干(不易過(guò)分干燥)。
6、 切片入ACP 孵育液，置于37°C溫箱，浸染45～60min，水洗。
7、 復(fù)染：蘇木素染色液染色5～8min或甲基綠染色液染色2～3min。
8、 水洗、晾干、鏡檢。

染色結(jié)果：
陽(yáng)性顆粒 紫紅色
細(xì)胞核 藍(lán)色（蘇木素）或綠色（甲基綠）

臨床意義：
1、白血病的毛細(xì)胞ACP染色呈強(qiáng)陽(yáng)性或中度陽(yáng)性，且不被酒石酸抑制。
2、急性白血病幼單核細(xì)胞ACP染色呈陽(yáng)性，原淋巴細(xì)胞呈弱陽(yáng)性，原粒細(xì)胞對(duì)ACP反應(yīng)不一。
3、T淋巴細(xì)胞ACP染色呈陽(yáng)性，顆粒粗大、分布密集。B淋巴細(xì)胞呈陰性或顆粒細(xì)小的弱陽(yáng)性。
4、戈謝細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性，尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性或弱陽(yáng)性。

注意事項(xiàng)：
1、ACP孵育液易失效，本法宜用皮膚穿刺血涂片，晾干后應(yīng)及時(shí)染色
2、對(duì)冰凍切片染色時(shí)，應(yīng)減少切片在室溫暴露的時(shí)間。
3、樣本需新鮮，取材后應(yīng)立即處理，否則會(huì)影響酶的活性。
4、組織固定需在4°C冰箱進(jìn)行，時(shí)間不宜超過(guò)24h，否則酶活性會(huì)減弱或消失。
5、組織在石蠟包埋時(shí)，溫度不宜高于56°C。應(yīng)使用熔點(diǎn)為52～54°C的石蠟進(jìn)行浸蠟，浸蠟時(shí)間要短，否則酶活性會(huì)減弱或消失。
6、不純的二甲苯會(huì)分解黑色沉淀，宜選用AR級(jí)以上的二甲苯。
7、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。