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伊紅染色液(醇溶)實(shí)驗(yàn)方法

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產(chǎn)品名稱:伊紅染色液(醇溶)
規(guī)格:100ml/500ml
分類:HE染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,3個(gè)月
用途:又稱曙紅染色液,常規(guī)切片染色
注意事項(xiàng):乙醇溶解,含防腐劑

產(chǎn)品說明:伊紅(Eosin)又稱曙紅,屬人工合成染料中的呫噸類染料,為桃紅色或粉紅色的粉末。伊紅(醇溶)分子式為C20H8Br4O5,分子量為649.9。伊紅最適宜不蘇木精配合染色以顯示正?;虿±斫M織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。伊紅染色液(醇溶)采用*防腐劑,操作簡(jiǎn)單,丌使用汞、甲醇等有毒試劑。常用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色,染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。

自備材料:系列乙醇、4%多聚甲醛

操作說明:
1、樣品處理
a)對(duì)于石蠟切片:
1)二甲苯(I)中脫蠟5-10min。
2)換用新鮮的二甲苯(Ⅱ),再脫蠟5-10min。
3)無水乙醇5min。
4)90%乙醇2min。
5)70%乙醇2min。
6)蒸餾水2min。

b)對(duì)于冰凍切片:經(jīng)固定的切片置蒸餾水2min。
c)對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:
①4%多聚甲醛固定10min以上,
②蒸餾水洗滌2min,
③換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2min。
2、伊紅染色對(duì)于上述處理好的樣品,伊紅染色液染色0.5-2min(根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
注:如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染,參考上述步驟在其它染色完成后進(jìn)行伊紅染色。

3、脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色
a)脫水、透明、封片:
1)95%乙醇脫水2min。
2)更換新鮮的95%乙醇再脫水2min。
3)二甲苯透明5min。
4)更換新鮮的二甲苯,再透明5min。
5)用中性樹膠或其它封片劑封片。
6)顯微鏡下觀察,細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。

b)進(jìn)行其它染色:如果進(jìn)行免疫熒光染色或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后:70%乙醇洗滌2次,每次2min。
PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5min。進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。

注意事項(xiàng):
1、如果需要脫水、透明和封片處理,需自備二甲苯,中性樹膠或其它封片劑。
2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

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