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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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Dacie氏液實(shí)驗(yàn)操作步驟

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產(chǎn)品名稱:Dacie氏液
規(guī)格:100ml
產(chǎn)品分類:細(xì)胞染色
保存條件:室溫,12個(gè)月
用途:用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
注意事項(xiàng):由檸檬酸鈉,甲醛等組成。

產(chǎn)品說明:紅細(xì)胞(redbloodcell,RBC),是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞。Dacie氏液的作用原理是用等滲稀釋液將血液按一定的倍數(shù)稀釋,充入計(jì)數(shù)池后顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)紅細(xì)胞數(shù),換算求出每升血液中紅細(xì)胞的數(shù)量。該紅細(xì)胞稀釋液僅用于科研領(lǐng)域,不用于臨床診斷。

自備材料:新鮮全血、微量吸管、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡

操作說明(僅供參考):
1.取小號(hào)試管,加Dacie氏液4.0ml。
2.用清潔干燥微量吸管取末梢血或抗凝血20µl,擦去管外余血后加至Dacie氏液底部,輕輕將血放出,再輕吸上層清液清洗吸管2~3次,立即混勻。
3.混勻后,用干凈微量吸管將紅細(xì)胞懸液充入計(jì)數(shù)池,棄去前四滴,不得有空泡或外溢,充池后靜置1-2min后計(jì)數(shù)。
4.高倍鏡下依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞。壓線細(xì)胞按“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右”的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)。

5.計(jì)算:紅細(xì)胞數(shù)/L=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×5×10×200×106
=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×1010
=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)/100×10

式中:
×5    5個(gè)中方格換算成1個(gè)大方格
×10   1個(gè)大方格容積為0.1ul,換算成1.0ul
×200  血液的實(shí)際稀釋倍數(shù)應(yīng)為201倍,按200倍便于計(jì)算
×106  由1ul換算成1L

注意事項(xiàng):
1.采血時(shí)不能過于擠壓,針刺深度應(yīng)適當(dāng)。
2.小試管、計(jì)數(shù)板均應(yīng)清潔,以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為紅細(xì)胞。
3.在參考范圍數(shù)值內(nèi),兩次紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相差不得超過5%。
4.不允許以血紅蛋白濃度來折算紅細(xì)胞數(shù)。
5.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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