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MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒使用方法

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中文名稱:MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
英文名稱:MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100t/500t
用途:又稱四氮唑鹽,常用于細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測
儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,12個(gè)月

MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測試劑盒,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。
MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解(圖1B)。然后通過酶標(biāo)儀可以測定570nm波長附近的吸光度(圖2)。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。

圖1.MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒實(shí)測效果圖。A.HeLa細(xì)胞加入使用本試劑盒配制的MTT溶液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時(shí),顯微鏡下可見大量結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan生成。B.不同數(shù)量HeLa細(xì)胞在MTT溶液(MTT solution)加入后4小時(shí)的效果圖(上圖)及深紫色產(chǎn)物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazan solvent),充分溶解后的效果圖(下圖)。

圖2. 本試劑盒檢測不同數(shù)量HeLa細(xì)胞的效果圖。不同的檢測條件下,實(shí)際讀數(shù)會(huì)因標(biāo)準(zhǔn)品的配制、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

本試劑盒采用了*的Formazan 溶解液配方,無需去除原有的培養(yǎng)液,可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時(shí)formazan被部分去除而引起的誤差。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。

保存條件:4℃或-20℃保存,MTT需避光保存,一年有效;MTT配制成溶液后需-20℃避光保存;Formazan溶解液也可以室溫保存。

注意事項(xiàng):
由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長,一定要注意蒸發(fā)的問 題。一方面,由于96孔板周圍一圈蕞容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面 ,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固,使用前請(qǐng)室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻 至全部融解后使用。
MTT配制成溶液后為黃色,需避光保存,長時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解 后使用。
Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以室溫或37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。加入Formazan溶解液后請(qǐng)適當(dāng)輕輕混勻,但須注意避免產(chǎn)生泡沫。
本產(chǎn)品僅限于 專-業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

 

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