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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體實(shí)驗(yàn)步驟

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中文名稱(chēng)  2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體說(shuō)明書(shū)
英文名稱(chēng)   Anti-C2orf84
別    名  C2orf84; CB084_HUMAN; Chromosome 2 open reading frame 84; FLJ30851; UPF0638 protein C2orf84.
濃    度  1mg/1ml
規(guī) 格  0.2ml/200μg
抗體來(lái)源  Rabbit
克隆類(lèi)型  polyclonal
交叉反應(yīng)  Human
產(chǎn)品類(lèi)型  一抗
研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量  predicted molecular weight: 24kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid
免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human C2orf84
產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500
亞    型  IgG
純化方法  affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

多克隆抗體制備過(guò)程:
蛋白抗原
↘抗原準(zhǔn)備→兔、小鼠免疫→抗血清→抗體純化  →鑒定(ELISA、WB、IHC)
多肽偶聯(lián)  ↗                                                 (抗原親和純化)
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體說(shuō)明書(shū)從細(xì)胞中提取出來(lái)的生物大分子是不純凈的,必須進(jìn)一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子制備工作中,分離純化是比較復(fù)雜和重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。對(duì)于異類(lèi)的物質(zhì),如提純蛋白質(zhì)和酶時(shí)混雜著核酸,提純核酸時(shí)混雜著蛋白質(zhì)或多糖,一般可用專(zhuān)一性酶水解、有機(jī)溶劑抽提、選擇性分部沉淀等方法處理,小分子物質(zhì)常在整個(gè)制備過(guò)程中多次液相與固相互相轉(zhuǎn)化被分離或蕞后用透析方法除去。而對(duì)同類(lèi)物質(zhì),如酶和雜蛋白,RNA和DNA以及不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)、酶、核酸之間的分離,情況則復(fù)雜得多,主要應(yīng)用的方法有電泳法、超速離心法、鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、吸附法、結(jié)晶法、電點(diǎn)沉淀法、柱層析法等。

抗體,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一種能特異性結(jié)合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染動(dòng)物體內(nèi)引發(fā)抗體產(chǎn)生的物質(zhì)。在體內(nèi),抗體是由于外 源性分子的侵襲而產(chǎn)生的??贵w以一個(gè)或者多個(gè) Y 字形單體存在,每個(gè) Y 字形單體由 4 條多肽鏈組成,包含兩條相同的重鏈和兩條相同的輕 鏈。輕鏈和重鏈?zhǔn)歉鶕?jù)它們的分子量大小來(lái)命名的。Y 字形結(jié)構(gòu)的頂端是可變區(qū),為抗原結(jié)合部位。

任何一個(gè)抗體的輕鏈都可以分為κ或λ型(基于小分子多肽結(jié)構(gòu)上的差異),每一個(gè)抗體的重鏈則決定了它的類(lèi)或型??贵w制備是指通向抗體生成的步驟,包括抗原樣品的制備以及將其安全注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或家畜體內(nèi),并由此誘發(fā)抗原特異性抗體在血清內(nèi)達(dá)到高表達(dá)水平,然后可從該動(dòng)物體內(nèi)回收抗體。

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