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賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基產(chǎn)品用途

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中文名稱:賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基
英文名稱:Lysine-decarboxylase Test Broth
保存條件:2~8℃,避光儲存,拆封后及時放入冰箱冷藏;
保質(zhì)期: 6個月-1年。
規(guī)格:10g/瓶
用途:生化培養(yǎng)基,賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

成分(g/L):
酵母浸粉             3.0
L-賴氨酸             5.0
葡萄糖               1.0
溴甲酚紫           0.016
pH值6 .7 ± 0.1     25℃

除溴甲酚紫外,將各成分加入蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min,加熱至*溶解,調(diào)至pH6.7±0.1。分裝于10mm×100mm試管,每管1mL。121℃高壓滅菌10min。滅菌后應(yīng)立即取出放涼,接種培養(yǎng)后,培養(yǎng)基顏色變?yōu)樯钭仙臑殛栃苑磻?yīng),變?yōu)辄S色的,為陰性反應(yīng)。

用法:稱取本品  9.0g ,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,分裝于試管(12mm*100mm),每管 1-1.5ml,121℃高壓滅菌15 分鐘,備用。

配置方法:
將蛋白胨、肉膏、葡萄糖、瓊脂及吡哆醛溶化后,調(diào)整pH為6.0~6.3。再按量加入溴甲酚紫和甲酚紅。在每100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi),分別按1%加入L-賴氨酸。另100ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基不加氨基酸作為對照。加入氨基酸后再調(diào)整pH至6.0~6.3,分裝小試管,15磅15分鐘滅菌,置高層。使用前,表面覆蓋一層滅菌液體石蠟。
賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基用于細(xì)菌生化試驗(yàn)。其中蛋白胨、酵母粉提供氮源,葡萄糖提供碳源,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,L-賴氨酸作為反應(yīng)底物。具有氨基酸脫羧酶的細(xì)菌,能分解氨基酸使其脫羧生成胺(賴氨酸→尸胺)和二氧化碳,使溶液為堿性,溴甲酚紫保持紫色。如果不脫羧,腸桿菌科的細(xì)菌能分解葡萄糖,產(chǎn)酸,溴甲酚紫變?yōu)辄S色。

氨基酸脫羧的對照管為葡萄糖發(fā)酵管,不含氨基酸,由于實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性的為保持紫色不變,陰性結(jié)果為黃色,為保證結(jié)果的可靠性,須同時接種對照管,如對照管變?yōu)辄S色,說明細(xì)菌接種成功,證實(shí)試驗(yàn)管紫色(不變色)為陽性,而非未接種好細(xì)菌。此外,由于氨基酸脫羧的產(chǎn)物為尸胺、腐胺等,遇氧不穩(wěn)定,故各管接種完細(xì)菌后,需加入幾滴液體石蠟隔絕空氣,保持胺的穩(wěn)定性。

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