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病毒保存液(非滅活型)使用方法

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病毒保存液(非滅活型)不含裂解鹽,但是保存的病毒完整性更好,檢出率更高,除了核酸檢測(cè)外還可以用于其他研究。非滅活的病毒保存液,具有抗細(xì)菌和抗真菌的作用;牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,可在病毒的蛋白質(zhì)外殼形成一種保護(hù)膜,使其不易分解,保證病毒的完整性;Hanks緩沖液構(gòu)建的中性環(huán)境,有助于增加病毒的生存時(shí)間和感染穩(wěn)定性。非滅活的病毒保存液通常用于臨床流感、禽-流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病毒標(biāo)本及支原體、脲原體、衣原體等標(biāo)本的采集及運(yùn)送。

一、病毒的特征:病毒是一類個(gè)體微小,無(wú)完整細(xì)胞結(jié)構(gòu),含單一核酸(DNA或RNA)型來(lái),必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并復(fù)制的非細(xì)胞型微生物。
1.含有單一知種核酸(DNA或RNA)的基因組和蛋白質(zhì)外殼,沒(méi)有細(xì)胞道結(jié)構(gòu),個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。
2.在感染細(xì)胞的同時(shí)或稍后釋放其核酸,然后以核酸復(fù)制的方式增殖,而不是以二分裂方式增殖;
3.嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性。病毒自身不能復(fù)制,而是將基因侵入宿主細(xì)胞內(nèi),借助后者的復(fù)制系統(tǒng)復(fù)制新的病毒。

二、非滅活型病毒保存液特點(diǎn):
1.低溫非凍型保存,不破壞病毒的外殼,方便長(zhǎng)途運(yùn)輸。
2.適用于各種拭子樣品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子、等
3.可以用于H1N1流感病毒和其他任何可以用拭子取樣的病毒。
4.可以用柱式病毒DNAout或柱式病毒RNAout提取病毒核酸。
5.采樣液中的抗生素能有效防止細(xì)菌和真菌污染。
6.采樣液添加了牛血清白蛋白,能保護(hù)病毒樣本,提高分離率。

病毒保存液(非滅活型)成分:
1.保存液成分為:Hanks液基礎(chǔ),慶大霉素,真菌抗生素,BSA(V),冷凍保護(hù)劑、生物緩沖劑及氨基酸等。
2.多種抗生素聯(lián)合,具有抗細(xì)菌和抗真菌的作用。
3.牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,可在病毒的蛋白質(zhì)外殼形成一種保護(hù)膜,使其不易分解,保證病毒的完整性。
4.Hanks緩沖液構(gòu)建的中性環(huán)境,有助于增加病毒的生存時(shí)間和感染穩(wěn)定性。
5.用于臨床流感、禽-流感(如H7N9)、手足口病、麻疹等病毒標(biāo)本及支原體、脲原體、衣原體等標(biāo)本的采集及運(yùn)送。

四、使用方法:
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子-好在發(fā)病的頭3天采集。
1.在安全柜內(nèi)本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。B型產(chǎn)品已經(jīng)在旋蓋離心管中,可以跳過(guò)此步。
2.鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
3.咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
4.直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
5.將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
6.將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)二級(jí)容器要承受不少于95KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
7.將二級(jí)容器擺放在運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,-好使用專車。8.采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)-系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存-好在-70℃溫度以下進(jìn)行。

低溫運(yùn)輸及保存,-20°,有效期一年。

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