產(chǎn)品名稱：葡聚糖凝膠 G-15  
英文名稱：Sephadex G-15 medium
CAS：11081-40-6
儲存條件：RT
外觀（性狀）：白色粉末
單位：瓶

說明：分離試劑，層析介質(zhì)。分離范圍：100-1500(肽)

葡聚糖凝膠（Sephadex）是白色珠狀顆粒，由葡聚糖經(jīng)醚鍵相互交聯(lián)聚合而成具有多孔性三度空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子分離材料，為穩(wěn)定的親水性凝膠，在水中和電解質(zhì)中很容易溶脹。不同型號的葡聚糖用英文字母G表示，如G-25，G-75等，G后面的數(shù)字除以10為該凝膠每克干重所吸收水的毫升數(shù)。能使一定分子范圍的大分子進入凝膠的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)內(nèi)。溶脹程度不同，分離分級范圍也不同。具體產(chǎn)品的分離范圍及應(yīng)用如下：

產(chǎn)品名稱           分離范圍             應(yīng)用

葡聚糖G-10       <700                 緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除下分子

葡聚糖G-15       <1500               緩沖液交換、脫鹽，分離小分子，去除下分子

葡聚糖G-25       1000-5000         工業(yè)上脫鹽及交換緩沖液

葡聚糖G-50       1000-30000       多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定

葡聚糖G-75       2000-70000       蛋白分離純化、分子量測定，平衡常數(shù)測定

葡聚糖G-100     2000-120000     蛋白分離純化、分子量測定，平衡常數(shù)測定

葡聚糖G-150     5000-300000     蛋白分離純化、分子量測定，平衡常數(shù)測定

葡聚糖G-200     5000-600000     蛋白分離純化、分子量測定，平衡常數(shù)測定

產(chǎn)品性質(zhì)

化學(xué)穩(wěn)定性：葡聚糖那不溶于一切溶劑（除非它被水解），在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都有很好的穩(wěn)定性，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑容易破壞凝膠，所以應(yīng)該避免使用。在濕空氣中易長霉，可用氯-仿、甲苯、疊氮鈉做防腐劑。

物理穩(wěn)定性：葡聚糖凝膠并不熔融，可以在濕態(tài)、中性pH進行滅菌或者高壓滅菌120°C，30分鐘不影響它的色譜性質(zhì)。干態(tài)的凝膠加熱至120°C以上開始焦糖化。

產(chǎn)品用途

利用分子篩作用，主要用于除鹽、多肽分離、清洗生物提取液，分子量的測定。

使用方法

1.凝膠預(yù)溶脹

在凝膠使用前，首先將其溶脹，具體方法：室溫下，將干粉浸泡在超純水中充分溶脹24小時，并不斷攪拌保證凝膠 充分溶脹；或者在室溫下，將干粉浸泡在50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠*溶脹，用超純水洗去乙醇；

2.裝柱

將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性注入柱內(nèi)，注意要避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或者斷層，保持濕態(tài)裝柱，可在凝膠可承受的操作壓下裝柱，保證裝柱均勻，裝完柱可以檢測柱效，檢查凝膠裝填是否合格。

3.平衡

上樣前用平衡液平衡層析柱至少3-5個柱體積直到基線平穩(wěn)；

4.上樣

凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，初次上樣建議控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可

5.洗脫方法

可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化；

6.在位清洗（CIP）

凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

7.保存

凝膠使用完后，可將其回收，可將凝膠用超純水沖洗干凈并濾干，加入0.02%的疊氮鈉做為防腐劑，或者浸泡在20%的乙醇中，防止長菌。