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DAB染色液使用說明書

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產(chǎn)品名稱: DAB染色液

英文名稱: 產(chǎn)品名稱(英文)Dako REALTM EnVisionTM Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse

產(chǎn)品性能結(jié)構(gòu)及組成試劑瓶A: 過氧化物酶

標(biāo)記物:過氧化物酶葡聚糖聚合物,Tris/HCl, 氯化鈉, 牛血清白蛋白,5-溴-5-硝基-1,3-二惡烷, 4-氨基安替比林,聚乙二醇(PEG 3000), 酪蛋白, 吐溫 20 pH7.6

試劑瓶B:DAB底物緩沖液:咪唑, N,N'-乙基雙(2-[2-羥基苯基]甘氨酸)(EDHPA), 乙基苯基聚乙二醇(Nonidet P-40),過氧化氫, 氯化苯二甲烴銨, pH 7.5。

試劑瓶C:DAB顯色劑:3,3二氨基聯(lián)苯胺四氯化碳溶于80%丙二醇中。

產(chǎn)品有效期:2-8℃,有效期18個月。

DAB染色液:用于免疫組化染色,應(yīng)用在Dako 自動染色系統(tǒng)上。

 

 

DAB染色液的使用方法

1.DAB顯色液配制

10mM Tris-HCl (pH7.6)   9mL  +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V)  NiCl2 或CoCl2   1mL ,顯色時加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用

2. 顯色

準(zhǔn)備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過氧化酶(HRP)標(biāo)記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。

3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個固相膜表面(可按比例增減)。

4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現(xiàn)。

5.用鑷子夾起固相膜,放進無離子水里清洗。

6.空氣中晾干。 

7. 拍照記錄 。

 

DAB染色液的注意事項

1. DAB溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出,應(yīng)確保結(jié)晶*溶解再行使用;

2. 顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用;

3. DAB在常溫下不穩(wěn)定,每次取用后均應(yīng)及時加蓋密封放回冰箱,以免因DAB分解影響實驗,或因滲漏造成實驗環(huán)境污染;

4. DAB有潛在致突變作用,操作時應(yīng)注意穿戴好防護用具。

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