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抗酸染色的基本原理:
分枝桿菌的植物細(xì)胞內(nèi)帶有很多的脂類,包圍著在肽聚糖的外邊,因此分枝桿菌一般不容易上色,要?dú)v經(jīng)加溫和增加上色時(shí)間來(lái)促進(jìn)其上色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染劑融合后,就難以被酸堿性脫色劑褪色,故稱抗酸染色。
齊-尼氏抗酸染色法是在加溫標(biāo)準(zhǔn)下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅堅(jiān)固融合成一氧化氮合酶,用鹽酸乙醇解決都不褪色。當(dāng)再加偏堿美蘭復(fù)染后,分枝桿菌依然為鮮紅色,而別的病菌及情況中的物質(zhì)為深藍(lán)色。
抗酸染色一般流程
1)初染
用裝片夾夾緊抗酸染色標(biāo)本采集,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火苗高空緩緩加溫,切忌燒開(kāi),出現(xiàn)蒸氣即臨時(shí)離去,若染色液揮發(fā)降低,應(yīng)加上染色液,以防干枯,加溫3-5分鐘,待標(biāo)本采集制冷后自來(lái)水清洗。
2)褪色
3%鹽酸乙醇褪色30秒~1分鐘;自來(lái)水清洗。
3)復(fù)染
用偏堿美蘭水溶液復(fù)染1分鐘,水清洗,用吸水海綿吸走后用食油鏡觀查。
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