細(xì)胞融合(cell fusion)，細(xì)胞遺傳學(xué)名詞，是在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個(gè)細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個(gè)雜za種細(xì)胞?；具^程包括細(xì)胞融合形成異核體(heterokaryon)、異核體通過細(xì)胞有絲分裂進(jìn)行核融合、最終形成單核的雜za種細(xì)胞。細(xì)胞融合可作為一種實(shí)驗(yàn)方法被廣泛適用于單克隆抗體的制備，膜蛋白的研究。

　　細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)所需試劑：

　　（1）胎牛血清或小牛血清

　?。?）培養(yǎng)基：細(xì)胞融合常用的培養(yǎng)液有DMEM、RPMI 1640 及無血清培養(yǎng)基等。DMEM有高糖（4500mg／L）及低糖（1000mg／L）之分。雜交瘤細(xì)胞在上述幾種培養(yǎng)基中均能良好的生長與增殖

　?。?）HAT及HT培養(yǎng)液：HAT、HT以五十分之一的比例加入培養(yǎng)基（ DMEM或RPMI 1640）

　?。ǎ矗┚垡叶迹≒EG）溶液：稱取一定量的PEG，高壓蒸汽滅菌（8磅30分鐘），待其冷至50℃左右，與等體積的RPMI1640混合，即為50%的PEG溶液，封口后4℃放置備用。用于細(xì)胞融合的PEG的分子量可在1000－6000之間，目前已有商品化的50%PEG溶液可直接用于細(xì)胞融合。

　　細(xì)胞融合的方法：

　　動(dòng)物細(xì)胞雜交或細(xì)胞融合

　　將兩個(gè)不同種的親本細(xì)胞A和B，以滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇(PEG)為融合誘導(dǎo)劑，使A和B兩細(xì)胞融合成為一個(gè)具兩個(gè)遺傳性不同核的異核體（如遺傳性相同的核融合在一起叫同核體）。

　　隨后異核體經(jīng)有絲分裂成為兩個(gè)具有A和B兩親本的za種融合核。AB雜za種經(jīng)多次分裂，B親本的染色體會(huì)逐漸減少到一個(gè)或完wan全消失。

　　PEG促進(jìn)細(xì)胞融合注意事項(xiàng)：

　?。?）事先做好兩種原生質(zhì)體融合的識(shí)別標(biāo)記，如色素、缺陷型、抗性標(biāo)記等。

　?。?）原生質(zhì)體或細(xì)胞密度應(yīng)在105個(gè)/ml，兩種原生質(zhì)體或細(xì)胞按1：1等量混合

　?。?）PEG誘導(dǎo)融合的效果，同分子量大小及濃度高低密切相關(guān)。分子量和濃度愈大，促進(jìn)細(xì)胞融合的能力愈高，而其粘度及對(duì)細(xì)胞的毒性也隨之增大，故通常以選用分子4000-6000濃度30-50%的PEG進(jìn)行融合為宜。

　?。?）PEG使細(xì)胞融合或致死劑量界限很狹小，為達(dá)到成功有效的融合，還必須嚴(yán)格掌握PEG的處理時(shí)間。一般加入PEG后，24℃培育10-20min（注意時(shí)間宜短不宜長，過長使原生質(zhì)體周圍包裹一層膜形成凝集體，降低融合率），緩緩加入高鈣離子溶液15min后用沖洗液清洗，離心收集細(xì)胞或原生質(zhì)體。