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ECC選擇性顯色培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)原理

時間:2020/9/21閱讀:899
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原理

HiCrome ECC顯色培養(yǎng)基使用了HiVeg特別蛋白胨替代動物源特別蛋白胨,使得培養(yǎng)基無BSE/TSE風(fēng)險(xiǎn)。該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基,用于初步鑒定來自食品和環(huán)境樣品的大腸桿菌和其他大腸菌群(3)。

培養(yǎng)基含兩種顯色原。一種被大腸埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解,產(chǎn)生藍(lán)色至紫色菌落,另一種被大腸菌群的半乳糖苷酶裂解,產(chǎn)生玫瑰紅-粉色菌落(1,2)。HiVeg特別蛋白胨和酵母粉提供氮源物質(zhì)、維生素B和其他必要生長營養(yǎng)素。乳糖提供可發(fā)酵的碳水化合物,中性紅為pH指示劑。磷酸氫二鈉和磷酸/二氫鉀為培養(yǎng)基的緩沖液。氯化鈉有助于維持滲透壓平衡。

使用前使培養(yǎng)基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(貨號MV028)進(jìn)行1:5或1:10稀釋食品樣品并進(jìn)行樣品勻漿。將勻漿液0.5ml或1ml用無菌玻璃涂布棒涂布在瓊脂表面并在35-37°C孵育18-24小時。孵育結(jié)束后對藍(lán)/紫菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),并乘以稀釋因子。大腸埃希菌的數(shù)目以每g食品為單位報(bào)告。

培養(yǎng)基組成

成分

克/升

HiVeg特殊蛋白胨

5.00

酵母粉

3.30

乳糖

2.50

磷酸氫二鈉

3.50

磷酸/二氫鉀

1.50

氯化鈉

5.00

顯色混合劑

20.30

中性紅

0.03

瓊脂

15.00

終 pH (25°C) 6.8±0.2

配制

55.83克溶于1000 ml蒸餾水。輕輕加熱使培養(yǎng)基*溶解。15磅(121℃)高壓滅菌15分鐘。冷卻至50℃?;靹虿A注無菌平皿。培養(yǎng)基可能不透明,不過不影響其性能。

質(zhì)量控制

粉末外觀:淡粉色均一自由流動粉末。

成膠性:結(jié)實(shí),相當(dāng)于1.5%瓊脂糖凝膠。

制備好的培養(yǎng)基的顏色和透明度:平皿內(nèi)為粉紅色不透明凝膠。

配比后的pH值:5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后,pH值自動為6.8 ± 0.2(25°C)。

培養(yǎng)反應(yīng)

35-37°C培養(yǎng)18-24小時后,觀察培養(yǎng)反應(yīng)

有機(jī)體

生長

菌落顏色

大腸桿菌(ATCC 25922)

旺盛

藍(lán)/紫

肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)

旺盛

玫瑰紅/粉紅

銅綠假單胞菌(ATCC 27853)

好-旺盛

稻草色

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