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免疫檢測試劑中常用的防腐劑有硫柳汞、疊-氮鈉、抗生素等。
1. 疊-氮鈉是HRP的抑制劑,凡是和HRP接觸的試劑,一定不能用;
2. 硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用,但因其有毒,較少使用;
3. 市面許多試劑盒產(chǎn)品,用抗生素做防腐劑較多,如慶大。
4. 如果試劑僅在實(shí)驗(yàn)室短期使用,其實(shí)并不需加防腐劑,常規(guī)試劑放4度冰箱,抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。
5. 梅里埃生產(chǎn)的HIV診斷試劑中提到:對照血清的防腐用0.1g/L硫酸慶大霉素和0.2ml/L肉桂醛。
6. 防污染可添加0.02%的疊-氮鈉,或0.01%的硫柳汞。疊氮鈉在多數(shù)情況下有用且有效,但在有些實(shí)驗(yàn)中卻不合適,因?yàn)樗茏钄嗉?xì)胞的電子傳遞鏈,對許多生物體都有毒性,因此不能用于活體實(shí)驗(yàn);因?yàn)楹邪被芨蓴_許多標(biāo)記方法;不能用于辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體。而硫柳汞不含氨基,不影響基質(zhì)的穩(wěn)定性。如果將抗體應(yīng)用于生物活性檢測、體內(nèi)實(shí)驗(yàn),一般不使用任何防腐劑,這些實(shí)驗(yàn)用的抗體應(yīng)少量分裝冷存,切忌反復(fù)凍融。
7. 吐溫-20是作為穩(wěn)定劑,可減少非特異性黏合。
甘油是防止凍融過程中的固-液相變而引起蛋白變性,能有效地增強(qiáng)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,-20度凍存時(shí)甘油的濃度可以在20~30%。
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