熒光染料是細(xì)胞生物學(xué)等科學(xué)研究中*的重要工具，熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關(guān)重要的一個(gè)部件。我們大家在操作熒光染料亮度的時(shí)候，我們可以按照上面的比較方法去比較熒光染料的亮度，那么一般熒光染料亮度怎么進(jìn)行比較?

       熒光染料的亮度可以用來(lái)比較不同熒光染料的熒光標(biāo)記效果，通過(guò)陰性細(xì)胞群與陽(yáng)性細(xì)胞群的熒光信號(hào)之間的關(guān)系來(lái)表示。但陰性細(xì)胞群的熒光信號(hào)受到信號(hào)強(qiáng)度、自發(fā)熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個(gè)因素相關(guān)。

       熒光染料染色指數(shù)是陽(yáng)性細(xì)胞群的平均熒光強(qiáng)度與陰性細(xì)胞群的平均熒光強(qiáng)度之差與陰性細(xì)胞群熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)差之間比值的一半。熒光染料染色系數(shù)只和抗體克隆與質(zhì)量、熒光團(tuán)純度與質(zhì)量、熒光修飾比、激光線及其功率、長(zhǎng)通和帶通濾光片、目的細(xì)胞等因素相關(guān)。

       熒光染料的染色指數(shù)與熒光染料的亮度呈正相關(guān)，也就是熒光染料亮度越高，染色系數(shù)也就高。

       DNA染料：

       圖1.用Cell Navigator™脂質(zhì)液滴熒光測(cè)定試劑盒（Cat＃22735）和Nuclear Green™LCS1（Cat＃17540）染色的油酸處理過(guò)的HeLa細(xì)胞的熒光圖像。

       細(xì)胞增殖染料：

       圖2.用CytoTell™Green和CFSE進(jìn)行的細(xì)胞增殖測(cè)定。在第0天，用CytoTell™Green或CFSE對(duì)Jurkat細(xì)胞（?2×106細(xì)胞/ mL）進(jìn)行染色。在的那天，以1：1的比例連續(xù)通過(guò)細(xì)胞。在通過(guò)當(dāng)天，在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細(xì)胞儀測(cè)量熒光強(qiáng)度。連續(xù)幾代人以不同的顏色代表。

       細(xì)胞活力檢測(cè)染料

       圖3.用CytoCalcein Violet 500（Cat＃22013）染色的活HeLa細(xì)胞圖像。細(xì)胞核用Hoechst 33342（Blue，Cat＃17535）染色。

       熒光標(biāo)記染料

       圖4.將 HeLa細(xì)胞與（Tubulin +）或不與（Tubulin-）小鼠抗微管蛋白一起孵育，然后與iFluor™488山羊抗小鼠IgG綴合物（綠色，左）或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG綴合物（綠色，右）。細(xì)胞核用Hoechst 33342（藍(lán)色）染色。