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細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)顆?;蚝邳c的原因和解決方法

時間:2019/12/19閱讀:2076
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     一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點或顆粒生成。首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁.污染包括細菌污染、支原體污染等。

     如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:

(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘?。?/p>

(2)血清質量不好,反復凍融的結果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;

(4)配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格.可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;

細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點或顆粒解決辦法:

1、如果小黑點有增殖趨勢,那么就有可能是污染了,需要處理;

2、如果小黑點沒有增殖趨勢,且不影響細胞生長,也不影響實驗的話,則可能是以下幾種情況。

a、是「黑膠蟲」,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲,也有人認為是細菌,或是真菌,也有人認為是血清中的蛋白的結晶?!负谀z蟲」可寄生于動物細胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠細胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,并隨細胞傳代而傳代。「黑膠蟲」與細胞競爭性生長,開始時對細胞并沒有什么影響,但當黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時候, 細胞生長就會受到影響直至死亡,嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前(這個至少是 10 年以前),很多實驗室在養(yǎng)細胞時用國產血清,那時的血清可能質量不過關,有所謂的「黑膠蟲」,但是也沒有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清,即使國產的,如四季青等稍大點的廠家,產品里這種現(xiàn)象就少見了。

b、是細胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運動。

c、是核糖體,也可能是雜質。

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