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RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)

時間:2017/11/21閱讀:2302
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中文名:RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格:100ml(其他規(guī)格請來電)

儲存條件:—20℃

有效期:12個月

用途:裂解細(xì)胞提取總蛋白質(zhì),主要用于Western,免疫沉淀。

組成:主要由NP-40、deoxycholate、SDS組成。不含蛋白酶抑制劑。

RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)

RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)簡介: 

RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)即RIPA lysis buffer (strong, without inhibitors),主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,不含蛋白酶、磷酸酯酶等抑制劑。使用本裂解液時,用戶可以根據(jù)具體用途自行添加特定抑制劑或者不添加抑制劑。

 

 

RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)操作步驟

1.開蓋前請低速離心一下,以便將黏附于管壁的液體甩至管底。

2.使用時,根據(jù)裂解液的用量加入蛋白酶抑制劑混合液(100×PIC),使其終濃度達(dá)到1×。

 

 

RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑)注意事項(xiàng):  

1.去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液后,如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不用清洗。  

2.如果裂解不充分可以適當(dāng)增加裂解液的用量,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。  

3.如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50~100萬細(xì)胞/離心管,然后再裂解。  

4.如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈Vortex 使樣品裂解充分。  

5.溶解Leagene RIPA Lysis Buffer時,應(yīng)盡量縮短溶解時間,避免有效成分失效。

6.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。

7.細(xì)胞裂解的操作步驟,應(yīng)置于冰上或4℃進(jìn)行。

8.如需添加蛋白酶等抑制劑,需自行準(zhǔn)備。

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