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(一)實驗?zāi)康模簩W習細菌的簡單染色法和革蘭氏染色法。(二)實驗原理:用于生物染色的染料主要有堿性染料、酸性染料和中性染料三大類。堿性染料的離子帶正電荷,能和帶負電荷的物質(zhì)結(jié)合。因細菌蛋白質(zhì)等電點較低,...
微生物操作中常見問題的討論與分析1、劃不出單個菌落的原因:(1)平板上有過多的水分;(2)劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復灼燒;(3)多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線。2、涂布和傾注的區(qū)別:涂布利于觀察,但由于涂布棒上會...
自行配制標準溶液基本要求1.采用具有高純度的溶質(zhì)或基準物質(zhì)(如金屬、金屬氧化物或金屬化合物;酸、堿、金屬有機化合物、適宜的鹽類、有機溶劑等)。2.為確保配制標準溶液的可靠性、準確性,實驗室的設(shè)備、環(huán)境...
培養(yǎng)基在使用之前必須進行滅菌處理,將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。其中,濕熱滅菌法又包括四種方式:煮沸法、流動蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽...
一、概念(一)消毒是指殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物,使之達到無害化的處理。根據(jù)有無已知的傳染源可分預防性消毒和疫源性消毒;根據(jù)消毒的時間可分為隨時消毒和終末消毒。(二)滅菌是指殺滅或清除傳播媒介上...
生物堿試劑沉淀蛋白質(zhì)的原理:植物體內(nèi)具有顯著生理作用的含氮堿性化合物成為生物堿。能沉淀生物堿或與其產(chǎn)生顏色反應(yīng)的物質(zhì)稱為生物堿試劑。當溶液PH小于等電點時,蛋白質(zhì)顆粒帶正電荷,容易與生物堿試劑的負離子...
瓊脂糖凝膠電泳中marker條帶出現(xiàn)波浪狀的原因主要有以下幾種?:1.?電壓過大或電泳時間過長?:電壓過大或電泳時間過長會導致條帶出現(xiàn)波浪狀。電壓過高會使DNA分子在凝膠中移動過快,導致條帶形狀不規(guī)則...
良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結(jié)果的基礎(chǔ)和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環(huán)節(jié),每一個步驟或環(huán)節(jié)都可能影響到染色的最終結(jié)果,因此,要做好一張高質(zhì)量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。...
RNA提取步驟:1.勻漿處理:①組織將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1mlTRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10%。②單層培養(yǎng)細胞直接在培養(yǎng)板中加入TR...
酚紅在細胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,但低血清或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定p...
生物堿是天然中藥材中分量很重的一類活性成分,多具有顯著而特殊的生理活性,在消炎、鎮(zhèn)痛、降血壓、抗癌等發(fā)面表現(xiàn)出越來越重要的藥用價值。傳統(tǒng)生物堿的分離方法主要有:浸漬、煎煮、溶劑回流、滲漉等,以及新開發(fā)...
病毒純化和蛋白質(zhì)純化都是生物制劑工程中常見的分離純化方法,但它們的對象不同,具體區(qū)別如下:1.病毒純化與蛋白質(zhì)純化對象不同。病毒純化的目標是將病毒從其它生物物質(zhì)中進行分離和去除,以獲得單個且純凈的病毒...
大腸桿菌(E.coli)重組蛋白表達技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展,相對于其他表達體系,算是非常成熟的一個體系。大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)主要有以下特點:遺傳背景清楚;易于培養(yǎng)和控制;轉(zhuǎn)化操作簡單;表達水平高;成本低;...
細胞數(shù)量確定1.將細胞懸浮液(100μL/孔)接種在96洞孔板中。將板在潮濕的培養(yǎng)箱中預孵育(例如,在37℃,5%CO2下)。2.向板的每個孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入氣泡,因為...
影響酶催化作用的因素主要有以下幾個方面:一、底物濃度在底物濃度較低時,反應(yīng)速度隨底物濃度的增加而急劇上升,兩者呈正比關(guān)系。隨著底物濃度的進一步增高,反應(yīng)速度不再成正比例增加,反應(yīng)速度增加的幅度不斷下降...
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