本方法是通過(guò)促細(xì)胞分裂劑與細(xì)胞表面受體相互作用，在體外觸發(fā)細(xì)胞的多克隆激活。根據(jù)所使用的促細(xì)胞分裂劑的不同，應(yīng)答細(xì)胞可以是T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞，或兩者同時(shí)，或者是單核細(xì)胞。 細(xì)胞激活可以通過(guò)細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子分泌、表面抗原表達(dá)和/或細(xì)胞體積的增加進(jìn)行檢測(cè)。例如在使用B細(xì)胞激活劑時(shí)，可以通過(guò)多克隆免疫球蛋白的分泌進(jìn)行檢測(cè)。

表1 常用的促細(xì)胞分裂劑和多克隆淋巴細(xì)胞激活劑 

促細(xì)胞分裂劑
所 用 濃 度

應(yīng) 答 細(xì) 胞

刀豆蛋白A ConA

1- 10 μg/ml

T 淋巴細(xì)胞

植物凝集素PHA

1-5 μg/ml

T 淋巴細(xì)胞

佛波醇酯PMA

1-10 ng/ml

T 淋巴細(xì)胞

婁諾霉素+PMA

100-500 ng/ml

T 淋巴細(xì)胞

脂多糖LPS

2-25 μg/ml

鼠b細(xì)胞（T不依賴(lài)型），

單核細(xì)胞

美洲商陸PWN

試驗(yàn)測(cè)定

人B細(xì)胞（T依賴(lài)型）

葡萄球菌A，SAC

1/1000-1/10000

人B細(xì)胞

試劑和設(shè)備： 
細(xì)胞懸浮液； 
96孔平底組織培養(yǎng)板； 
含血清培養(yǎng)基（通常為 RPMI 1640,含10% 胎牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素）； 
促細(xì)胞分裂劑（見(jiàn)表1），要求純品或半純品，有市售商品； 
多通道移液器和微量移液器； 
帶570nm濾片的酶標(biāo)儀； 
超凈工作臺(tái)； 
CO2孵箱； 
冷凍離心機(jī)。