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上海士鋒生物科技有限公司
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轉(zhuǎn)化子DNA的快速鑒定

時間:2015-12-21閱讀:737
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實驗?zāi)康?/em>

1、選擇性培養(yǎng)基上的轉(zhuǎn)化子為材料檢測重組質(zhì)粒dna分子的大小,選出合理的重組的轉(zhuǎn)化體菌株。
2、掌握快速細胞破碎法,測定大小不等的質(zhì)粒DNA。

實驗原理

利用Cracking gel緩沖液,采用快速細胞破碎法直接從菌體中提取DNA

實驗操作

(一)制備0.8%瓊脂糖凝膠(30 ml)

(二)取eppendorf管,每管加30μl Cracking gel緩沖液

(三)每扁頭牙簽,將菌落刮到Eppendorf管中

(四)在37℃水浴中保溫15分鐘

(五)取出各管,40℃,12,000 rpm/min,離心15分鐘

(六)立即吸出各管上清液15μl,進行點樣電泳

(七)當(dāng)溴酚蘭遷移到凝膠板的2/3處時,停止電泳。

(八)將電泳凝膠染色30分鐘

觀察質(zhì)粒的遷移距離,并拍照供進一步分析。

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