目的和要求

1 學習和掌握用苯酚法及鹽溶液法從動物組織提取核酸的原理及操作技術。
2 練習從動物組織提取RNA，并鑒定純度。

實驗原理

利用苯酚法可以直接從動物組織中提取RNA，組織勻漿用苯酚處理并離心后，RNA即溶于上層被酚飽和的水層中，DNA和蛋白質則留在酚層中，向水層加入乙醇后RNA即呈白色絮狀沉淀析出。

操作步驟

1 稱取3克肝組織，剪成小塊，置于研缽中，加3-4滴90%的苯酚溶液后研磨，勻漿中加入15mL水，轉移至三角燒瓶中，加10mL酚至三角燒瓶中。

2 室溫下劇烈振蕩45分鐘，于3000rpm離心20分鐘。

3 用吸管將上層液吸出，并加入1/2體積的氯仿-異戊醇，于低溫下振蕩20分鐘，以除去提取液中的蛋白質，以2000rpm離心10分鐘，吸出上層清液，向上清液中加入醋酸鉀粉末，使zui后濃度大約為2%，裝入小燒杯后，一邊攪拌，一邊緩慢加入兩倍于上清液體積的95%乙醇以沉淀RNA。

4 于冰浴中放置半小時后，以1000rpm離心5分鐘，沉淀再用少量75%乙醇洗滌1-2次，收集沉淀，置于干燥器內干燥，稱重。

5 測定A260/A280的值，應大于1.85，若小于1.85，則說明含雜蛋白和DNA高了。