（一）原理
組成核酸分子的堿基，均具有一定的吸收紫外線特性，zui大吸收值在波長為250~270nm之間。核酸的zui大吸收波長是260nm，這個(gè)物理特性為測(cè)定核酸溶液濃度提供了基礎(chǔ)。

在波長260nm紫外線下，1OD值的光密度相當(dāng)于雙鏈DNA濃度為50μg/ml；單鏈DNA或RNA為20μg/ml?？梢源蝸碛?jì)算核酸樣品的濃度。

分光光度法不但能確定核酸的濃度，還可通過測(cè)定在260nm和280nm的紫外線吸收值的比值（A260/A280）估計(jì)核酸的純度。DNA的比值為1.8，RNA的比值為2.0。若DNA比值高于1.8，說明制劑中RNA尚未除盡。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白質(zhì)將導(dǎo)致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干擾。當(dāng)然也會(huì)出現(xiàn)既含蛋白質(zhì)又含RNA的DNA溶液比值為1.8的情況，所以有必要結(jié)合凝膠電泳等方法鑒定有無RNA?；蛴脺y(cè)定蛋白質(zhì)的方法檢測(cè)是否存在蛋白質(zhì)。紫外分光光度法只用于測(cè)定濃度大于0.25μg/ml的核酸溶液。對(duì)于很稀的溶液可采用熒光光度法。

（二）操作
取DNA樣品作適當(dāng)稀釋，配制成5~50ug/ml的溶液，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定260nm處的光密度值（OD260），按下列公式計(jì)算，求出該樣品的DNA含量。
DNA濃度（ug/ml ）=OD260/0.02×L×稀釋倍數(shù)
（L為比色杯的厚度（光徑），一般為1cm。）