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摘要: 本文簡述了PCR基本原理以及模板擴增方法,介紹了pcr檢測系統(tǒng)的整體構(gòu)成,描述了信號檢測的A/D接口電路,討論了數(shù)據(jù)分析軟件的設計原理,并對兩種分析方法的特征和對結(jié)果的影響做了比較分析。 關鍵字: 聚合酶鏈反應; 信號檢測; Ct值; 標準曲線 中文分類號:TP274.5 文獻標識碼:A 文章編號: Abstract: The principle of PCR and the method of amplification of PCR template are introduced firstly. Then the composition of PCR detection system is presented. The A/D interface circuit of signal detection is described. The design principle of data analysis software is discussed. The features and the implication on the results of two different data analysis methods are compared in detail finally. Key words: Polymerase Chain Reaction; Signal Detection; Cycle threshold; Standard curve 1 引言 現(xiàn)代生物化學與分子生物學是在生物化學、遺傳學、微生物學、生物物理學、免疫學以及信息科學相互滲透融匯的基礎上發(fā)展起來的,已經(jīng)成為生命科學和醫(yī)學中的前沿學科。 PCR (Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈反應)可以非常簡便快速地采取體外擴增的方式從微量生物材料中獲取大量特定的遺傳物質(zhì),所以被迅速應用到生命科學、醫(yī)學研究、遺傳工程、SARS等疾病診斷以及法醫(yī)和考古學等領域,被稱為分子生物學實驗技術發(fā)展的里程碑。
PCR技術原理是將待擴增的DNA做模板,用來與模板正鏈和負鏈互補的兩種寡聚核苷酸做引物,經(jīng)過模板DNA的變性、模板與引物結(jié)合復性以及在dna聚合酶作用下發(fā)生引物鏈延伸反應等三步循環(huán)來擴增兩引物間的DNA片段。每一循環(huán)的DNA產(chǎn)物經(jīng)變性后又成為下一個循環(huán)的模板DNA。整個工作過程需要在三種不同溫度下(即變性、退火、延伸)循環(huán)完成,每經(jīng)歷一次循環(huán)可使基因增加一倍,經(jīng)過30次左右的循環(huán),zui終使基因擴增100萬倍以上
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