產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3特性 | 懸浮生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3特性
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 這是C. Milstein建立的骨髓瘤細(xì)胞株S210的衍生株。 未經(jīng)C. Milstein同意不得銷售或提供給第三方。 這株細(xì)胞具8-氮*抗性,HAT敏感,可與大鼠B細(xì)胞融合大鼠-大鼠雜交瘤。 檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1×105~2×106cells/ml。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人抗紡錘體抗體(MSA)免疫試劑盒 Human mitotic spindle apparatus antibody,MSA ELISA Kit
人抗丙型肝炎病毒抗體(anti-HCV)免疫試劑盒 Human anti-hepatitis C virus(HCV)antibody ELISA Kit
人抗丙氨酰tRNA合成酶,線粒體(AARS2)抗體免疫試劑盒 Human anti alanyl-tRNA synthetase,mitochondrial(AARS2)antibody ELISA kit
人抗丙氨酰tRNA合成酶,細(xì)胞質(zhì)(AARS)抗體免疫試劑盒 Human anti alanyl-tRNA synthetase,cytoplasmic(AARS)antibody ELISA kit
人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)免疫試劑盒 Human epidermal basement membrane zone,EBMZ ELISA Kit
人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)免疫試劑盒 Human anti-typhus antibody ELISA Kit
人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗體 免疫試劑盒 Human Candida Albicans(C.albicans)IgE antibody ELISA Kit八(*基硅烷基)Q8 Octakis(trimethylsiloxy)silsesquioxane 51777-38-9
PSS-辛基苯基取代物 Octaphenylsilsesquioxane 5256-79-1
*酸 Barbituric acid 67-52-7
巴豆醛(劇毒) CROTONALDEHYDE 4170-30-3
巴豆酸;β-甲基丙烯酸;亞乙基乙酸;2-丁烯酸(反式);1-羧基丙烯;α-丁烯酸 Crotonic acid;α-Crotonic acid;β-Methylacrylic acid;Solid crotonic acid;1-Carboxypropylene;α-Butenic acid 107-93-7
鈀 PalladiuM 7440/5/3
斑蝥素 Cantharidin;Cantharides caMphor;Cantharidic acid anhydride;Lactone of cantharidic acid;Hexahydro3α,7α-diMethyl-4,7-epoxyisobenzofuran-1,3-dione 56-25-7
半固體瓊脂 Motility Test Medium(Semisolid)
半水合 4-苯酸聯(lián)氨硫酸 , 98% 4-Hydrazinobenzenesulfonic acid 98-71-5
半纖維素酶(-20℃) HEMICELLULASE 9025-56-3
刀豆球蛋白A(+4℃) CONCANAVALIN A TYPE III 11028-71-0
胞苷 99% Cytidine 65-46-3
胞苷-2(3`)磷酸 NA