還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
蛋白質(zhì)樣品的制備是 2D 電泳成功的關(guān)鍵,尤其是對(duì)植物材料,因?yàn)橹参锊牧?不但有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁,還含有大量的、可以干擾 2D 電泳的物質(zhì)(如多糖、脂類、 多酚、次生代謝物等)。本產(chǎn)品就是專門(mén)針對(duì)這一困難而開(kāi)發(fā),它有下列特點(diǎn):
1. 可以處理各種植物材料(葉片、種子、果實(shí)等),包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡(jiǎn)單,只有振蕩和離心等簡(jiǎn)單步驟。 3. 能有效去除植物樣品中常見(jiàn)的、干擾 2D 電泳的物質(zhì)。
還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:
規(guī)格及成分:
使用方法:
1、 稱取 0.1-0.5g 植物組織(如果是葉片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果實(shí),一般用 0.3-0.5g;如果是種子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上繼續(xù)研磨至成糊狀。注意:如果樣品富含蛋白酶, 還可以在溶液 A 中加入相應(yīng)的蛋白酶抑制劑(自備)。
3、 將研磨液轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5mL 塑料離心管中,顛倒混勻后 4℃ 15000g 離心 15 分鐘。
4、 將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 1.5mL 塑料離心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,顛倒混勻。
6、 在冰上放置 15 分鐘或在-20℃冰箱過(guò)夜。
7、 4℃ 15000g 離心 15 分鐘,小心移棄上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃預(yù)冷的溶液 C,震蕩混合。
9、 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,移棄上清液。
10、重復(fù)步驟 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃預(yù)冷的溶液 D,震蕩混合后 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,去 凈上清液。
12、冷凍干燥 1~2 分鐘,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自備的等電聚焦上樣 液在室溫下(溫度不要超過(guò) 30℃)溶解 30 分鐘,再室溫 10000g 離心 2 分 鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 1.5mL 塑料離心管中。后續(xù)試驗(yàn)包括 Bradford 蛋白定量和 2D 電泳。2D 電泳對(duì)蛋白上樣量要求十分嚴(yán)格,因此強(qiáng)烈建議用 戶在進(jìn)行 2D 電泳前測(cè)定所得蛋白的濃度。
〖其他名稱〗:酸性綠5;亮綠(淡黃);亮綠2G;亮綠S;亮綠2GN;酸性綠;黃色淺綠SF;淡綠SF淡黃;黃光亮綠;酸性綠 SF
〖CAS號(hào)〗:5141-20-8
C37H34N2O9S3Na2=792.85
〖級(jí)別〗:FMP
〖含量〗:≥85.0%
Em (Lambda Max, Water):>63500
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深紫色或紅棕色結(jié)晶或結(jié)晶粉末。易溶于水呈綠色溶液,加入鹽酸則轉(zhuǎn)為黃棕色,以后漸漸褪色。加入氫氧則幾乎全部褪色,析出暗紫色沉淀?!既埸c(diǎn)〗288℃(分解),zui大吸收波長(zhǎng)630(422)nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)用作細(xì)胞學(xué)上的復(fù)染色,或Gomori's步驟中用作苯胺蘭的替代物。漿質(zhì)染色劑。動(dòng)物組織染色。與〖鐵〗蘇木素或其他核染料作對(duì)比染色。植物組織學(xué)中作細(xì)胞質(zhì)和纖維染色。和酸性品紅共染花粉管
〖保存〗:RT
萘酚綠B
〖英文名稱〗:Naphthol green B;Acid green 1;Green PL;1-Nitroso-2-naphthol-6-sodium sulfonate ferric salt;Naphthol green;C.I. 10020
〖其他名稱〗:酸性綠O;酸性綠I;顏料綠;媒染草綠;1-亞硝基-2-萘酚〖鐵〗色淀;1-亞硝基-2-萘酚-6-磺酸鈉〖鐵〗鹽;曬化綠B;萘酚綠BN ;三[5,6-二氫-5-(羥基亞氨)-6-氧代-2-萘磺酸(2-)-N5,O6]〖鐵〗酸(III)三鈉
〖CAS號(hào)〗:19381-50-1
C30H15FeN3Na3O15S3=878.47
〖級(jí)別〗:BS
生物染色試驗(yàn):合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:深綠色粉末。溶于水呈黃綠色溶液,*存放分解。zui大吸收波長(zhǎng)714nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色;測(cè)定鎂的絡(luò)合指示劑。萘酚綠B能與酸性鉻藍(lán)K組成了混合指示劑-KB指示劑,使其顏色變化更敏銳,由紫紅變?yōu)樗{(lán)綠
〖保存〗:RT,避光
MgCl2溶液,25mM,PCR 5mL 聚乙二醇溶液
明膠溶液,2%,PCR 1.5mL 硫酸*
高 GC DNA 清除劑,PCR 1.5mL 碘化丙啶苯
MnCl2溶液,25mM,PCR 5mL 活性藍(lán) 19
甲酰胺,PCR 5mL 馬來(lái)酸鈉
MgSO4溶液,10mM,PCR 5mL 硼氫化氰鈉
石蠟油,PCR 10mL 乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺
DMSO,PCR 1.5mL 多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬(wàn) )
海藻糖溶液,1.5M,PCR 1.5mL 多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬(wàn) )
甜菜堿溶液,5M,PCR 1.5mL 多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬(wàn) )
綠如藍(lán)染料,PCR 0.1mL D- 果糖 -6- 磷酸二鈉
綠如藍(lán)染料,PCR 1mL *抑制劑
dNTP 溶液 ,10mM 0.5mL Nα- 苯甲酰*乙酯
dNTP 溶液 ,10mM 5mL 二甲苯青
dNTP 溶液,2.5mM