成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體(antibody,Ab)是機體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測病原體常用的成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復三次。測定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測定效價后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關產(chǎn)品如下:hz-3222R Phospho-HSL (Ser959+960) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
hz-3223R Phospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
hz-3224R Phospho-HSL (Ser865) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
hz-3358R Phospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
hz-6013R HRASLS2 HRAS樣抑制因子2抗體
hz-2145R Hrasls3/HREV107 HRAS樣抑制因子3抗體
hz-3904R HSD11B1/HSD1 羥基類固醇脫氫酶11β1抗體
hz-3618R HSD11B2 羥基類固醇脫氫酶11β2抗體
hz-3855R HSD17B1 羥類固醇脫氫酶17β-HSD抗體
hz-3856R HSD17B2 羥類固醇脫氫酶17β2抗體
hz-3905R HSD17B3 羥類固醇脫氫酶17β3抗體
hz-5071R HSD3a 羥基類固醇脫氫酶3α抗體
hz-3906R HSD3B1 滋養(yǎng)層細胞抗原3β-HSD抗體
hz-2366R HSD3B7 滋養(yǎng)層細胞抗原3β7抗體
hz-1688R HSP20 熱休克蛋白-20抗體
hz-3672R HSP22 熱休克蛋白-22抗體
hz-0730R HSP27/HspB1/HSP25 熱休克蛋白27抗體
hz-3179R Phospho-HSP27(Ser78) 磷酸化熱休克蛋白27抗體
hz-3180R Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化熱休克蛋白27抗體
hz-3225R Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化熱休克蛋白27抗體
hz-5361R Phospho-HSP27 (Ser254) 磷酸化熱休克蛋白27抗體
hz-5833R HSP58/Cornulin 熱休克蛋白58抗體
hz-0191R HSP60 熱休克蛋白-60抗體
hz-1538R HSP47 熱休克蛋白-47抗體
hz-0126R HSP70/HSPA1A 熱休克蛋白-70抗體
hz-5117R HSP71 熱休克蛋白71抗體
hz-5362R phospho-HSP70(Tyr41) 磷酸化熱休克蛋白70抗體
hz-5365R phospho-HSP70(Tyr525) 磷酸化熱休克蛋白70抗體
hz-1446R HSP75/TRAP1 熱休克蛋白75抗體
hz-0696R HSP90 α 熱休克蛋白90α抗體
hz-0889R HSP90 alpha 熱休克蛋白90α/HSP90 α抗體
hz-3181R Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7) 磷酸化熱休克蛋白90α抗體