細胞簡介:
兔氣管上皮分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C”字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞,還作為效應(yīng)細胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 氣管 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7096 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠生長分化因子1(GDF1)試劑盒 ,英文名: GDF1 ELISA Kit
Mouse pepsin (Pepsin) ELISA Kit 小鼠(Pepsin)試劑盒
RatVitaminE,VEELISAKit 大鼠(VE)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHCBII(HumanCollagen-likeBioproteinII)ELISAKit人膠原蛋白Ⅱ
細胞WNV(WESTNILE)病毒定性試劑盒20次
UlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荊豆凝集素(UEA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠基質(zhì)細胞衍生因子-1α 英文名稱: somal-derived factor-1 a 英文縮寫: SDF-1α
小鼠基質(zhì)細胞衍生因子-1R 英文名稱: somal-derived factor-1 R 英文縮寫: SDF-1R
小鼠可溶性E-選擇素 英文名稱: soluble E-Selectin 英文縮寫: sE-Selectin/sCD62E
小鼠可溶性L-選擇素 英文名稱: soluble L-Selectin 英文縮寫: sL-Selectin/sCD62L
周期素依賴激酶抑制劑/P27單克隆抗體
小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒
Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit 人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanadrenalcoexaibody,ACA試劑盒人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MET)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
γ-5羧酸合成酶抗體
CD8A重組雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白 Protein
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142 0.5mgp- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 0酸化β-連環(huán)蛋白抗原
DOT1L重組人 DOT1L / KMT4 蛋白 Protein
DCBLD2 Protein Human 重組人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 蛋白
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白
兔氣管上皮細胞p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142 0.5mgp- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 0酸化β-連環(huán)蛋白抗原
DCBLD2 Protein Human 重組人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 蛋白
CD8A重組雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白 Protein
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白
DOT1L重組人 DOT1L / KMT4 蛋白 Protein