細(xì)胞簡介：
兔椎間盤髓核分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 椎間盤組織 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7128 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 ，英文名： ADAM8 ELISA Kit
Mouse lipoprotein lipase (LPL) ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒
Rathiston-H2bELISAKit 大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFlt3LELISAKit大鼠FMS樣酪激酶3配體
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶3H同位素標(biāo)記試劑盒20次
RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠促性腺素釋放素受體（GHR）試劑盒 96T/48T
小鼠釋放激素(GH)試劑盒 96T/48T
小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒 96T/48T
小鼠促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒 96T/48T
1號(hào)染色體開放閱讀框53抗體
小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒
Humanhistatin5ELISAKit 人富組蛋白(histatin5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVP試劑盒人抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量試劑盒20次
HumanαLactalbumin，α-LaELISAKit人α乳清蛋白(α-La)試劑盒規(guī)格：96T/48T
內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203抗體
CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 Protein
SRF(Serum response factor 0.5mgSRF(Serum response factor) 血清應(yīng)答因子抗原
PRDX1重組人 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein
EIF5A Protein Human 重組人 EIF5A 蛋白
S100A4 Protein Human 重組人 S100A4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
兔椎間盤髓核細(xì)胞SRF(Serum response factor 0.5mgSRF(Serum response factor) 血清應(yīng)答因子抗原
EIF5A Protein Human 重組人 EIF5A 蛋白
CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 Protein
S100A4 Protein Human 重組人 S100A4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PRDX1重組人 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein
