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植物基因組DNA提取試劑盒*

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公司名稱南京信帆生物技術(shù)有限公司
品牌
型號
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2017/9/20 10:41:37
訪問次數(shù)1285

產(chǎn)品標(biāo)簽:

植物基因組DNA提取試劑盒

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　　南京信帆生物技術(shù)有限公司是一家專注于為學(xué)校、科研機(jī)構(gòu)提供實(shí)驗室的產(chǎn)品（包括各種易耗品、化學(xué)試劑、生物培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品、檢測試劑盒等）和生物化學(xué)類檢測服務(wù)的公司。南京信帆生物技術(shù)有限公司不僅僅銷售國產(chǎn)各類試劑，同時代理經(jīng)銷歐美國家各品牌產(chǎn)品，主要品牌有：Jackson, MP Biomedicals, Miltenyi,Illumina，Bovogen,Sigma，Abnova，Life technologies，Perkin Elmer,Nugen,Xcessbio,R&D,Tocris，CST，Abcam，Dako,DSHB，Bioxcell，Neuromab,Beckman，F(xiàn)ST,Quantifoil,Streck，Axygen，Corning,3M等。產(chǎn)品類型主要有：一抗、二抗、抗原、重組蛋白、細(xì)胞因子、多肽、激酶、流式抗體、磁珠分選、試劑盒、抗體芯片、抑制劑、激動劑、化合物，胎牛血清，BSA，采血管，鑷子等，所有產(chǎn)品均應(yīng)用于科研領(lǐng)域。提供的檢測服務(wù)有：

　　（1） RT-PCR實(shí)驗技術(shù)服務(wù),QPCR(熒光定量PCR）；

　　（2） EMSA實(shí)驗技術(shù)服務(wù)；

　　（3）基因克隆突變服務(wù)；

　　（4）放免檢測服務(wù)；

　　（5） ELISA試劑盒檢測服務(wù)

　　（6） HE染色/特殊染色/技術(shù)服務(wù)、免疫組化實(shí)驗服務(wù)；

　　（7）免疫沉淀；

　　（8） Tunel凋亡染色；

　　（9） Western-blot 實(shí)驗服務(wù)；

　　（10） RNAi/基因過表達(dá)；RNA干擾實(shí)驗服務(wù)；南京信帆生物技術(shù)有限公司，是一家專注于為學(xué)校、科研機(jī)構(gòu)提供實(shí)驗室的產(chǎn)品（包括各種易耗品、化學(xué)試劑、生物培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品、檢測試劑盒等）和生物化學(xué)類檢測服務(wù)的公司。

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ELISA試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、金標(biāo)檢測試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒、生化試劑盒。各種動物血清,各種抗體,細(xì)胞,耗材,生物試劑。

產(chǎn)品簡介在線詢價

南京信帆生物技術(shù)有限公司專業(yè)銷售植物基因組DNA提取試劑盒,現(xiàn)貨供應(yīng)，發(fā)貨及時，歡迎。

植物基因組DNA提取試劑盒* 產(chǎn)品信息

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗，不得用于醫(yī)療或食用

產(chǎn)品名稱：		植物基因組DNA提取試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：		50T
產(chǎn)品貨號：		D1500-50
單位：		盒
供應(yīng)商：		上海信帆生物

植物基因組DNA提取試劑盒
1. 勻漿和細(xì)胞裂解。
使用不同的實(shí)驗材料需采用不同的勻漿步驟，具體說明如下：
【從動物組織中提取基因組DNA】
◆使用研缽進(jìn)行勻漿時：
① 取1～100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中，快速用力展研成勻漿。
注）下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
A．富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
B．富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
C．富含角質(zhì)蛋白的組織或堅硬的組織（如骨骼）等。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1，溫和研磨30秒鐘。
注）使用上述①-注）的實(shí)驗材料時，請在加入Solution A及RNase A1后，將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中。如果勻漿體積不足650 μl，請補(bǔ)充Solution A至650 μl，65℃保溫5分鐘。
◆使用研磨棒進(jìn)行勻漿時：
① 取1～100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊狀。
② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
③ 加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中，充分振蕩混合后，65℃保溫5分鐘。
植物基因組DNA提取試劑盒
【從植物材料或植物培養(yǎng)細(xì)胞中提取基因組DNA】
① 按下表稱取適量的新鮮植物材料（如選用的是冷凍干燥植物材料，則用量減半），剪成小塊放入研缽中，加入液氮，待樣品冷凍*后快速、用力研磨至粉末狀。研磨時應(yīng)間斷加入液氮以防止材料融化。
植物材料種類
植物材料使用量*
植物花、葉片
10～100 mg
植物莖
60～240 mg
植物根
80～240 mg
植物種子
80～240 mg
* 如選取植物的根、種子等樣品時，因其基因組DNA含量很低，需使用超過表格中所示的參數(shù)用量，此時請分兩管進(jìn)行步驟1～6的實(shí)驗操作，在步驟7的操作中再將各管溶液分次加入至同一Spin Column中過濾，使各管的基因組DNA結(jié)合到同一個Spin Column上。
如從培養(yǎng)的植物細(xì)胞中提取基因組DNA，請離心收集2×103～1×107的培養(yǎng)植物細(xì)胞，加入150 μl水充分懸浮細(xì)胞后移入研缽中，加入液氮后快速、用力研磨至粉末狀。
注）樣品研磨應(yīng)充分，否則將會嚴(yán)重影響基因組DNA的收率。
② 將研缽移至65℃水浴，當(dāng)樣品粉末剛開始融化時，向研缽中加入700 μl的Solution A和1.2 μl的RNase A1，用力碾磨30秒。
③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿移至Collection Tube中。如勻漿體積不足650 μl，請補(bǔ)充Solution A至650 μl。65℃保溫15分鐘。
注）處理富含纖維的根/莖等植物材料或富含淀粉、蛋白質(zhì)的種子等時，可延長水浴時間至60分鐘。
【從全血中提取基因組DNA】
① 取10～250 μl的全血（含抗凝劑）加入至Collection Tube中。
② 加入500 μl的Solution A。
③ 加入1 μl的RNase A1，激烈振蕩15秒鐘后，冰浴5分鐘。
注）人與動物的抗凝全血的一次處理量為≤250 μl；禽類、兩棲類的抗凝全血的一次處理量為≤10 μl。
【從培養(yǎng)細(xì)胞中提取基因組DNA】
◆使用懸浮培養(yǎng)的動物細(xì)胞時：
① 使用Collection Tube收集1×105～1.5×107的細(xì)胞懸浮液，5,000 rpm離心5分鐘，棄上清（細(xì)胞培養(yǎng)液）。
② 加入150 μl的滅菌蒸餾水或PBS懸浮細(xì)胞。
③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1，激烈振蕩15秒鐘，然后室溫靜置1分鐘。
植物基因組DNA提取試劑盒
◆使用貼壁細(xì)胞時：
① 棄盡培養(yǎng)液，向培養(yǎng)皿中加入650 μl的Solution A，室溫靜置1分鐘。
注）96孔板等的每個孔中一次容納不了650 μl 溶液時，請分?jǐn)?shù)次處理細(xì)胞。
② 用移液槍的槍頭吹落貼壁培養(yǎng)細(xì)胞，取650 μl的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至Collection Tube中。
③ 加入0.8 μl的RNase A1，激烈振蕩15秒鐘，然后室溫靜置1分鐘。
2. 加入400 μl的Solution B，振蕩混合。
3. 加入1 ml的4℃預(yù)冷的Solution C，充分混勻后，12,000 rpm離心2分鐘。
4. 棄去上層有機(jī)相，再加入1 ml的4℃預(yù)冷的Solution C，充分混勻后，12,000 rpm離心2分鐘。
5. 棄去上層有機(jī)相，然后將水相溶液（無色下層）轉(zhuǎn)移至置于Collection Tube上的Filter Cup中，12,000 rpm離心1分鐘。
注）有機(jī)相（上層）帶有顏色，請務(wù)必除盡，否則會阻礙DNA結(jié)合到DNA制備膜上。相間沉淀不必考慮，在過濾時將被去除。
6. 棄Filter Cup，在濾液中加入400 μl的DB Buffer，混合均勻。
7. 將試劑盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。將上述操作6混合溶液轉(zhuǎn)移至Spin Column中，12,000 rpm離心1分鐘，棄濾液。
8. 將500 μl的Rinse A加入至Spin Column中，12,000 rpm離心30秒鐘，棄濾液。
9. 將700 μl的Rinse B加入至Spin Column中，12,000 rpm離心30秒鐘，棄濾液。
注）請沿Spin Column管壁四周加入Rinse B，這樣有助于*沖洗沾附于管壁上的鹽份。
10. 重復(fù)操作步驟9。
11. 將Spin Column安置于新的1.5 ml的離心管上，在Spin Column膜的中央處加入50～200 μl的滅菌蒸餾水或Elution Buffer，室溫靜置1分鐘。
注）把滅菌蒸餾水或Elution Buffer加熱至65℃使用時有利于提高洗脫效率。
12. 12, 000 rpm離心1分鐘洗脫DNA。
如果實(shí)驗室備有適合于Spin Column接口的負(fù)壓裝置，可從上述操作步驟6完成以后進(jìn)行以下操作。
7. 將試劑盒中的Spin Column插到負(fù)壓裝置的插口上，將上述操作步驟6的混合溶液轉(zhuǎn)移到Spin Column中，開啟調(diào)節(jié)負(fù)壓裝置，緩慢吸走Spin Column中的溶液（流速控制在1滴/秒）。
8. 將負(fù)壓調(diào)至zui大，向Spin Column中加入500 μl的Rinse A，吸盡Spin Column中溶液。
9. 向Spin Column中加入700 μl的Rinse B，吸盡Spin Column中溶液。
注）請沿Spin Column管壁四周加入Rinse B，這樣有助于*沖洗沾附于管壁上的鹽份。
10. 重復(fù)操作步驟9。然后從負(fù)壓裝置上取下Spin Column，將其安置于試劑盒中的Collection Tube上，12, 000 rpm離心1分鐘。
11. 將Spin Column安置于新的1.5 ml的離心管上，在Spin Column膜的中央處加入50～200 μl的滅菌蒸餾水或Elution Buffer，室溫靜置1分鐘。
注）把滅菌蒸餾水或Elution Buffer加熱至65℃使用時有利于提高洗脫效率。
12. 12, 000 rpm離心1分鐘洗脫DNA。
植物基因組DNA提取試劑盒
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