細(xì)胞簡介:
兔脾淋巴分離自脾臟組織;脾臟是機體大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,是機體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與9-11肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結(jié)腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)白細(xì)胞的一種,由淋巴器官產(chǎn)生,機體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當(dāng)器官(有人認(rèn)為在哺乳動物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細(xì)胞,成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。
方法簡介:
實驗室分離的兔脾淋巴采用機械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×106cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔脾淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 脾臟 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7818 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔脾淋巴體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代步驟:
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)試劑盒 ,英文名: NOX1 ELISA Kit
Mouse platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒
RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 大鼠IX(FIX)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGM(HumanGasicMucin)ELISAKit人胃粘液素
細(xì)胞繁殖與毒性高通量篩選熒光試劑盒500次
RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-1(mouse MIP-1) 作用: ELISA
小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-2(mouse MIP-2) 作用: ELISA
小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-3a(mouse MIP-3a) 作用: ELISA
小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-3β(mouse MIP-3β) 作用: ELISA
FAM50B蛋白抗體
小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human Glucose depende insulin releasing polypeptide (GIP) ELISA Kit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒
Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISAKit 人生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanactivatinganscriptionfactor-1,ATF-1試劑盒人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂質(zhì)過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次
MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit小鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
含丙氨酰tRNA合成酶結(jié)構(gòu)域1抗體
REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein
FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長因子-7/纖維母細(xì)胞生長因子 (抗原)
FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白
兔脾淋巴細(xì)胞FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長因子-7/纖維母細(xì)胞生長因子 (抗原)
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)
REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白
FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein