CELL-WISE 293無血清培養(yǎng)基
品牌 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 報價（RMB） |
CELL-WISE | BalanceCD293 培養(yǎng)基 | CW01001 | 1L | 400 |
產(chǎn)品描述：
Balance CD 293 培養(yǎng)基適用于懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293細(xì)胞（如293-F,293-T, Expi-293F
等）的高密度生長和瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá)。 Balance CD 293 培養(yǎng)基含有細(xì)胞生長所需的全部營養(yǎng)成份，無需添加任何添加物即可使用。（注意：此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清）
產(chǎn)品特點:
瞬時轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基，適用于HEK293細(xì)胞高密度懸浮培養(yǎng)
無蛋白、無動物源、化學(xué)成分限定
即用型*培養(yǎng)基,無需添加額外成分
技術(shù)參數(shù)：
外觀： | 澄清透明紅色液體 |
滲透壓： | 275±15 mOSM |
pH: | 6.9-7.4 |
無菌檢測: | 無菌 |
內(nèi)毒素： | <5 EU/mL |
儲存條件： | 2-8℃，避光 |
效期： | 12個月 |
產(chǎn)品用途： | 僅用于科學(xué)研究，不適用于人類或動物的診斷和治療 |
使用方法：
細(xì)胞馴化
1）直接馴化
大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細(xì)胞，可以直接適應(yīng)Balance CD 293 medium，只要按照日常傳代方式（稀釋）更換培養(yǎng)基即可。
2）漸進(jìn)式馴化
注意：選用低代次、處于對數(shù)生*的細(xì)胞進(jìn)行馴化
①在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細(xì)胞生長穩(wěn)定，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到2x10 6 cells/ml后進(jìn)行傳代，傳代細(xì)胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL，5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25；
②將細(xì)胞置于37℃，5% CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng)；
③當(dāng)細(xì)胞密度3-4天后達(dá)到3x10 6 cells/ml且細(xì)胞活率>90%，傳代時5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50，細(xì)胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細(xì)胞生長慢，可離心上清，留20%條件培養(yǎng)基，加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；
④重復(fù)步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到*的Balance CD 293培養(yǎng)基；
⑤經(jīng)過在*的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后3-4天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3×10 6 cells/mL，細(xì)胞活率大于90%，這說明細(xì)胞已經(jīng)*適應(yīng)了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時，細(xì)胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL，一般傳代2-3次后再進(jìn)行轉(zhuǎn)染實驗。
注意: 一般細(xì)胞馴化過程中，前三代細(xì)胞的狀態(tài)可能不是很好，但一般從第四代狀態(tài)會有改善。
細(xì)胞傳代
1）取細(xì)胞培養(yǎng)樣品，人工或儀器測定細(xì)胞密度以及活率；
2）計算傳代所需的細(xì)胞用量，建議起始細(xì)胞密度為0.2-0.4×10 6 cells/mL。建議復(fù)蘇的細(xì)胞至少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為15-20 mL（100 mL的培養(yǎng)瓶）或50-60 mL（250 mL 的培養(yǎng)瓶）；
3）將細(xì)胞置于37℃，5%CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng)，3-4天傳代一次。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染在Balance CD 293培養(yǎng)基中，采用商業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑（例如 Gibco 293Fectin™ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit ）或 PEI 可以實現(xiàn)對 HEK293 細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染。
CELL-WISE 293無血清培養(yǎng)基
關(guān)鍵詞：293細(xì)胞培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)、HEK293細(xì)胞培養(yǎng)。
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