產(chǎn)品說明
本產(chǎn)品直接以血液為模板，用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 進行擴增，擴增產(chǎn)物直接通過電泳檢測。
產(chǎn)品特點
1.簡便：無需事先對血樣進行提純，直接用血液為模板擴增目的基因；
2.高效：多數(shù)抗凝劑存在條件下，*的抗抑制能力，能有效擴增雜質(zhì)較多的模板。
適用范圍
1. EDTA、肝素、檸檬酸鈉抗凝方法保存的新鮮或冷凍血樣；
2. 未加抗凝劑的血樣和干血；
3. 血液基因組的擴增檢測。
產(chǎn)品介紹
本試劑盒以血液為模板直接進行DNA擴增，擴增產(chǎn)物可直接點樣電泳。該試劑盒中含有新設(shè)計的Taq酶突變體，這些使它能夠耐受全血樣品中存在的抑制劑。在大多數(shù)抗凝劑存在下，包括肝素、檸檬酸和EDTA等，Taq酶依然擴增性能良好。由于其可以從血液直接進行擴增，免除了繁瑣的DNA提取步驟，加快了工作流程，降低了污染的風險。
產(chǎn)品特點
1. 簡便：無需事先對血液進行提純，直接用血液為模板擴增目的基因；
2. 高效：多數(shù)抗凝劑存在條件下，*的抗抑制能力，能有效擴增雜質(zhì)較多的模板。
產(chǎn)品用途
1.未加抗凝劑的血液樣本；
2.添加了肝素、檸檬酸、EDTA 等抗凝劑的血液樣本；
3.血液基因組擴增檢測。
使用建議
1.使用時添加≤10%的全血為模板，若擴增不出目的條帶， 酶量可加倍。加上血液后將管中各組分輕輕混勻。
2.2mM Mg2+可以滿足絕大多數(shù) PCR 擴增，對于某些 PCR， 為了保證較好的擴增，可調(diào)
節(jié)為 2-5mM。
保存溫度
-20℃保存。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品組成 | 體積 |
2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+） | 1.25ml |
dNTPs（各 10mM） | 100μl |
Direct Taq DNA 聚合酶（400U） | 100μl |
使用方法
常用反應(yīng)體系 (25μl):
2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+*） | 10μl |
上游引物 | 0.2-1.0 μM（終濃度） |
下游引物 | 0.2-1.0 μM （終濃度） |
dNTPs（各10mM） | 1μl |
全血 | 0.1-2.5μl |
Direct Taq DNA 聚合酶（400U） | 1μl |
ddH2O | 至 25 μl |
*Mg2+終濃度為 3.5mM
常用PCR設(shè)置
當擴增片段＜3K | 當擴增片≥（推薦引物長度≥30bp） |
94℃， 1 分鐘 30 秒
55-60℃，20 秒 30-40循環(huán) 72℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分鐘 4℃ 保溫 |
94℃， 5 分鐘
68℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分鐘 4℃ 保溫
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