以下是RT-PCR試劑盒的訂購(gòu)信息:
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
神經(jīng)肉孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Sarcocystis neuronaPCR PCR檢測(cè)試劑盒
肉孢子蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒 Sarcocystis spp.PCR PCR檢測(cè)試劑盒
馬疥螨PCR檢測(cè)試劑盒 Sarcoptes scabiei var(equi)PCR PCR檢測(cè)試劑盒
疥螨通用PCR檢測(cè)試劑盒 Sarcoptidae ssp.PCR PCR檢測(cè)試劑盒
牛血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma bovisPCR PCR檢測(cè)試劑盒
柯拉松血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma curassoniPCR PCR檢測(cè)試劑盒
不明血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma incognitumPCR PCR檢測(cè)試劑盒
印度血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma indicumPCR PCR檢測(cè)試劑盒
,羊血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma mattheei,PCR PCR檢測(cè)試劑盒
鼻血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma nasalePCR PCR檢測(cè)試劑盒
梭形血吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma spindalePCR PCR檢測(cè)試劑盒
血吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒 Schistosoma spp.PCR PCR檢測(cè)試劑盒
施馬倫貝格病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Schmallenberg Virus(SBV)RTPCR PCR檢測(cè)試劑盒
塞姆利基森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Semliki Forest Virus(SFV)RTPCR PCR檢測(cè)試劑盒
仙臺(tái)病毒PCR檢測(cè)試劑盒 Sendai Virus(SV)RTPCR PCR檢測(cè)試劑盒
RT-PCR試劑盒技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。