Kovacs氏靛基質試劑盒
培養(yǎng)基的過濾澄清
液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃ 的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ,每1000ml 培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5 分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
若能自行沉淀者,亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
緩沖劑
由于發(fā)酵過程中pH對形成生物產物的影響很大,為維持穩(wěn)定的pH,常采用緩沖劑,例如碳酸鈣或磷酸鹽。后者除能調節(jié)pH外,還為培養(yǎng)基提供磷源。 前體或代謝調節(jié)劑 前體是指某一種化合物被加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中之后,能直接參與產物的生物合成中去。如在青霉素G(即芐基青霉素)的發(fā)酵過程中,加入適當?shù)钠S基化合物(如苯乙酸)能明顯提高青霉素 G的產量。 代謝調節(jié)劑中包括抑制劑和誘導劑,當一種抑制劑加入到發(fā)酵過程中時能抑制不需要的產物,而大量產生所需的特定產物(或中間體)。如在四環(huán)素發(fā)酵中,加入溴化物能抑制金霉素(即氯四環(huán)素)的形成,從而增加四環(huán)素的產量。至于誘導劑,多數(shù)酶的生成需要它來誘導。在正常情況下,酶所需的基質或基質的類似物,可用作誘導劑。如曲霉產生α-淀粉酶時需要淀粉作誘導劑。