規(guī)格及成分:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器*的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),大吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的大吸收光譜在 500nm,大發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
產(chǎn)品名稱:水稻內(nèi)源基因SPS 核酸檢測(cè)試劑盒說明書
規(guī)格:48T/盒
編號(hào):BH-P4872
分類:熒光-PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。?
規(guī)格及成分:
產(chǎn)品名稱成 分 編 號(hào) 十孔盒包裝
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀劑 50903 400 μL
TdT(末端轉(zhuǎn)移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手冊(cè) 101105sc 1 份
CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紅四氮唑質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTTC,TTZ,Tetrazolium Red
小鼠顆粒細(xì)胞MGC*質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSulfamethoxypyridazine
UI-1細(xì)胞,人前列腺癌細(xì)胞 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞,IEC-6細(xì)胞 人氣管平滑肌細(xì)胞HTSMC硫酸*,硫酸丁胺*質(zhì)量規(guī)格:含量674-786ug /mg,USP30Amikacin Sulfate
HOS(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硫酸*(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定Amikacin Sulfate
22RV1(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H043人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人骨骼肌成肌細(xì)胞RNAHSkMM miRNA5 μg兩性霉素B質(zhì)量規(guī)格:>750ug /mg,USP,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)Amphotericin B
ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP ciate lyase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 對(duì)茴香醛乙醇溶液(含乙酸和硫酸)p-Anisaldehyde (contains Acetic Acid, H2SO4) Ethanol Solution質(zhì)量規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2二甲亞砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC))Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
SK-N-MC細(xì)胞,神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]重水 99.8原子%DDeuterium Oxide 99.8atom%D質(zhì)量規(guī)格:99.8原子%D
小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT3-(*基硅基)-1-丙磺酸鈉(>98.0%(T))Sodium 3-(Trimethylsilyl)-1-propanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 二甲基硒(>98.0%(GC))Dimethylselenide質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
水稻內(nèi)源基因SPS 核酸檢測(cè)試劑盒說明書Hep 3B(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
AGRP Others Human 人 AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27(6-27),人,雞,小鼠,豬,大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人角膜上皮細(xì)胞HCEpiC垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(16-38),人,雞,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽相關(guān)肽(1-29),大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
HMy2.CIR 人 B 淋巴母細(xì)胞胰多肽,人Pancreatic Polypeptide,human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。