規(guī)格及成分:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器*的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),大吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的大吸收光譜在 500nm,大發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
產(chǎn)品名稱:豬源性成分(Porcine)核酸檢測試劑盒報(bào)價(jià)
規(guī)格:48T/盒
編號:BH-P4834
分類:熒光-PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。?
規(guī)格及成分:
產(chǎn)品名稱成 分 編 號 十孔盒包裝
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀劑 50903 400 μL
TdT(末端轉(zhuǎn)移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手冊 101105sc 1 份
白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF*質(zhì)量規(guī)格:≥630µg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Ribostamycin Sulfate
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利福布丁質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRRifabutin
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(傣族);KM9403堿式乙酸鋁(>50%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>50%,BRAluminum acetate, basic
CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氟化鋁三水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAluminum fluoride trihydrate
人子宮頸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL酸性氧化鋁(>90%,BC)質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BCAluminum oxide, active
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT 116 [HCT116]二甲基亞砜(農(nóng)殘級)Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級
REG1A Others Human 人 REG1A / PSPS 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基*基氯化銨(DTAC)(99%,離子對色譜級)Dodecyltrimethylammonium chloride質(zhì)量規(guī)格:99%,離子對色譜級
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHBMEC NA二十酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC))Methyl Arachidate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)
KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 聚酰胺粉(柱層析用)Polyamide質(zhì)量規(guī)格:柱層析用
大鼠肝癌細(xì)胞;RH-35聚酰胺粉(柱層析用,200-400目)Polyamide質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,200-400目
豬源性成分(Porcine)核酸檢測試劑盒報(bào)價(jià)人成纖維母細(xì)胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 )達(dá)格列嗪;*Dapagliflozin質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,生化試劑級
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元甘草查而酮 A(標(biāo)準(zhǔn)品)Licochalcone A質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77 大鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL三氯卡班Triclocarban 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%
P815 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞*(標(biāo)準(zhǔn)品)Clofazimine質(zhì)量規(guī)格:供TCL鑒別用
CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) *酯Cefuroxime axetil質(zhì)量規(guī)格:745~875μg/mg,USP
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。