細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細胞;SO2價格準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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產品描述:
細胞名稱 抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細胞;SO2價格
形態(tài)特性淋巴母細胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性可產生單克隆抗體,抗原為SARS病毒N蛋白。
培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法保持細胞密度在1×105~1×106cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況不詳
凍存條件基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR-
同工酶
染色體
注意事項:
?1.一般客戶拿到抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細胞;SO2價格后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
*Anti-CEA/HRP辣根過氧化物酶標記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-CEA/Biotin生物素化鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-GST-Tag/Biotin生物素標記兔抗重組谷胱甘肽轉移酶GST標簽蛋白抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-CD167a(DDR1)/HRP辣根過氧化物酶標記CD167a抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-Alpha-HCG/Gold膠體金離子α亞基人絨毛膜促性腺激素單抗IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-Beta-HCG/Gold膠體金離子標記小鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-PSA/Gold膠體金離子標記抗鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體(檢測)IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-TRF/Gold金離子標記抗轉鐵蛋白抗體IgG規(guī)格:0.5ml(15nm)
*Anti-CD8/PE熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-VWF/PE熒光素PE標記血管性血友病因子抗體IgG規(guī)格:0.2ml
抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細胞;SO2價格*Anti-MTHFR/FITC熒光素標記亞甲基四氫葉酸還原酶抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-MTL/FITC熒光素標記胃動素抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-MTLR/FITC熒光素標記抗胃動素受體抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-MTNR1A/MTR-1A/FITC熒光素標記褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-MTNR1B/MTNR-1B/FITC熒光素標記褪黑素受體1B抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-mTOR/FITC熒光素標記雷帕霉素靶蛋白抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-mucin-1/Muc-1/CD227/FITC熒光素標記粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-Muc2/FITC熒光素標記粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-mucin-3/Muc-3/FITC熒光素標記粘蛋白-3抗體IgG規(guī)格:0.2ml
*Anti-mucin4/Muc4/FITC熒光素標記粘蛋白-4抗體IgG規(guī)格:0.2ml
冷凍保存細胞之方法:
抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細胞;SO2價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。