古朵生物是專業(yè)從事科研試劑的商家，詳細為您介紹RT EasyTM II*鏈cDNA合成試劑盒(For qPCR)，特點，性能，注意事項等，本司專業(yè)營進口/國產(chǎn)ELISA試劑盒，質(zhì)粒載體，美國Omega品牌系列產(chǎn)品，培養(yǎng)基，抗體，染色液，緩沖液，溶液，動物血清血漿，標準品，實驗耗材，氨基酸，蛋白質(zhì)，多肽，酶，細胞株，有機試劑，無機試劑，環(huán)保試劑等,價格實惠，品種齊全，歡應訂購！

產(chǎn)品名稱:*鏈cDNA合成試劑盒(For qPCR)
英文名稱:RT EasyTM II
產(chǎn)品規(guī)格:50 rxns  200 rxns    
系列:RT/RT-PCR系列
產(chǎn)品貨號:RT-01021
保存說明:-20℃
產(chǎn)品描述:已添加優(yōu)化配比的反轉(zhuǎn)錄引物，只需加入RNA即可進行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA直接用于qPCR

 
RT EasyTM II*鏈cDNA合成試劑盒(For qPCR) 操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50?l，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50?l，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

注意事項：
1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
2.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
 

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