人組織因子(TF)elisa試劑盒說(shuō)明書試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人組織因子(TF)elisa試劑盒說(shuō)明書 Human tissuefactor,TF ELISA Kit
人組織因子(TF)elisa試劑盒說(shuō)明書 【實(shí)驗(yàn)用途】組織因子(tissuefactor,TF), 組織因子在凝血和血管內(nèi)血栓形成中起重要作用,它不僅存在于血管外組織細(xì)胞中,而且也存在于血循環(huán)細(xì)胞中。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TFB顯色。TFB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
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人組織因子(TF)elisa試劑盒說(shuō)明書液體類標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
人組織因子(TF)elisa試劑盒說(shuō)明書的操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
小鼠5羥二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA試劑盒 ,英文名: 5-HETE ELISA Kit
槐凝集素(SJA)ELISA檢測(cè)試劑盒Sophorajaponicaagglinin,SJAELISAKit 96T/48T
人B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31(BCAP31)免疫試劑盒 Human BCAP31 ELISA kit
英文名稱MouseiFABPELISAKit小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測(cè)定試劑盒(過(guò)氧亞硝基陰離子)20次
Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 大鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒
HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISA試劑盒人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂質(zhì)過(guò)氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA定量測(cè)定試劑盒48/96次
Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
瓜酸 ELISA. 96T/48T
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標(biāo)簽)
LLC 小鼠肺癌細(xì)胞
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HBL-100人整合SV40基因的上皮細(xì)胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
人成纖維細(xì)胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse
CL-0309TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人神經(jīng)元總RNAHN NA
SHG44細(xì)胞,膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞,WI-38AV13細(xì)胞 膀胱成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人組織因子(TF)elisa試劑盒說(shuō)明書SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標(biāo)簽)
LLC 小鼠肺癌細(xì)胞
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HBL-100人整合SV40基因的上皮細(xì)胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
人成纖維細(xì)胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse