總RNA提取試劑 Trizol Reagent

產(chǎn)地：美國

品牌：Invitrogen

型號(hào)：invitrogen 15596-026

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:TRIlzo是一種新型總RNA抽提試劑，可以直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA。其含有*、異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。

TRIzol在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性，因此對(duì)純化DNA及標(biāo)準(zhǔn)化RNA的生產(chǎn)十分有用。

總RNA提取試劑 Trizol Reagent的成分:
TRIzol的主要成分是*。*的主要作用是裂解細(xì)胞，使細(xì)胞中的蛋白，核酸物質(zhì)解聚得到釋放。*雖可有效地變性蛋白質(zhì)，但不能*抑制RNA酶活性，因此TRIzol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源RNase(RNA酶)。

※0.1%的8－羥基喹啉可以抑制RNase，與Cl仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用。

※異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑，可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)消失，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解，核蛋白迅速與核酸分離。

※β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵。

的使用方法:
用勻漿器將組織磨碎，加入TRIzol處理組織。5分鐘后加入Cl仿，以每分鐘12000轉(zhuǎn)離心5分鐘，樣品即分成水樣層、中間層和有機(jī)層。

※RNA存在于水樣層中，收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀RNA來還原。

※在除去水樣層后，有機(jī)層中的DNA和蛋白質(zhì)也能相繼以沉淀的方式還原：乙醇能使中間層的DNA沉淀析出，在有機(jī)層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質(zhì)。

每100ml TRIzol可以抽提100個(gè)六孔板中的樣品或100個(gè)50-80mg的組織樣品。無論樣品是人、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌組織，該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(約五百萬個(gè))及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(超過一千萬個(gè))均有較好的分離效果。

每一百萬細(xì)胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA，每毫克組織用TRIzol抽提可得1-10微克RNA(產(chǎn)量因細(xì)胞和組織不同而異)。

TRIzol操作上的簡(jiǎn)便性允許其同時(shí)處理多個(gè)樣品，所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。

TRIzol抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白質(zhì)的污染，故而能夠作RNA 印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+ 選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和單分子克隆(PCR)。

※如果是用于PCR，當(dāng)兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時(shí)，建議用級(jí)聯(lián)擴(kuò)大的DNase I來處理抽提的總RNA。

※TRIzol試劑能促進(jìn)不同種屬、不同分子量大小的多種RNA的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的RNA經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見許多介于7kb和15kb之間的不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分)，兩條優(yōu)勢(shì)核糖體RNA條帶位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間 (tRNA, 5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)，其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA時(shí)宜-70℃沉淀過夜。

TRIzol對(duì)人體有害，使用時(shí)應(yīng)戴一次性手套，注意防止濺出。

Invitrogen相關(guān)資料:

Invitrogen一步法總RNA提取試劑/Trizol Reagent

使用Invitrogen公司的TRizol試劑，可快速簡(jiǎn)單地獲得高純度總RNA。

Invitrogen公司的一步法總RNA提取試劑TRIZOL比其他純化方法可提高產(chǎn)率30%-150%。這種TRIZOL試劑的酚和異硫氰酸胍的均相溶液可直接用于從人類、動(dòng)物、植物、細(xì)菌等的細(xì)胞或組織中提取總RNA、DNA或蛋白質(zhì)。

TRIZOL試劑純化的RNA可用于PCR、RNA印跡分析、poly(A)+篩選或斑點(diǎn)雜交。純化的DNA和蛋白質(zhì)分別適用于DNA和蛋白質(zhì)印跡分析。 
獲得高純度RNA(A260/A280>1.9) 
在1小時(shí)內(nèi)分離RNA；在3小時(shí)內(nèi)分離DNA或蛋白質(zhì) 
鮮明的紅色染料使去除含RNA的液相簡(jiǎn)單便捷 
無論是小量的細(xì)胞(5×106)或組織(50-100mg)還是大量的細(xì)胞(107)或組織(>1g)都可得到出色的結(jié)果 
在4℃條件下可穩(wěn)定保存兩年以上 
可使用TRIZOL用于組織或細(xì)胞；使用TRIZOL LS用于血液或其他液體樣品

品名: TRIzol Reagent

15596-026

TRIzol® Reagents are ready-to-use, monophasic solutions of phenol and guanidine isothiocyanate suitable for isolating total RNA, DNA, and proteins (1-6). Isolation procedures are based upon improvements to the single-step RNA isolation method

General Specifications

Top Contents & Storage:

TRIzol® and TRIzol® LS Reagents include the indicated amount of reagent. The TRIzol® Max™ Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol® Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.