【古朵生物】ELISA試劑盒的操作方法、注意事項(xiàng)和優(yōu)勢(shì)

　　ELISA Kit通稱為ELISA試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒，是一種靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法，且因其試劑穩(wěn)定，易保存，耗時(shí)短，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷客觀等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中，得到科研工作者的認(rèn)可。

　　ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(capture Ab)固定在固相載體上，再加入一級(jí)檢測(cè)抗體(primarydetection Ab)，形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標(biāo)記了，即可用來直接測(cè)定抗原的量，若無，則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。測(cè)定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate)，作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系，依此原理計(jì)算出樣本中的抗原總量或濃度。

　　產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

　　1.采用高效、靈敏、特異的抗體。

　　2.易保存、耗時(shí)短、操作簡(jiǎn)便、性價(jià)比高。

　　3.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性，線性范圍好。

　　4.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體。

　　5.適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種標(biāo)本類型。

　　ELISA試劑盒操作方法：

　　1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋，請(qǐng)按照說明書進(jìn)行操作。

　　2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

　　3.加樣：不規(guī)范的移液操作可能帶來誤差。

　　1)空白孔，空白對(duì)照孔不加樣品，sws標(biāo)記的抗體，鏈霉親和素-HRP，只加顯色劑A&B和終止液，其余各步操作相同;

　　2)標(biāo)準(zhǔn)品孔：加入標(biāo)準(zhǔn)品50ul，鏈霉親和素-HRP50ul(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好抗體，故不加);

　　3)待測(cè)樣品孔：加入樣本40ul，然后各加入抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul，蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻，37℃溫育60分鐘。

　　4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

　　5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

　　6.顯色：每孔先加入顯色劑A50ul，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

　　7.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

　　8.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

　　9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。

　　10.僅供參考，以試劑盒內(nèi)實(shí)際說明書為準(zhǔn)。

　　Elisa試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。