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大鼠破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基操作說(shuō)明

2019年11月15日 14:48上海撫生實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量：526

                         大鼠破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基操作說(shuō)明

    秋天的風(fēng)，秋天的葉，秋天的色調(diào)，秋天的陽(yáng)光，構(gòu)成了一幅絕妙的秋景圖。圖畫(huà)中埋藏了許許多多的秘密，只要我們善于發(fā)現(xiàn)，就可以揭開(kāi);圖畫(huà)中蘊(yùn)藏了許許多多的人生哲理，只要我們積極求索，就可以領(lǐng)悟。圖畫(huà)中展現(xiàn)了許許多多多姿的人生，只要我們端正態(tài)度，就可以擁有。接下來(lái)介紹大鼠破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基操作說(shuō)明。

 

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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