毒蕈堿型*受體拮抗劑抑制小細(xì)胞肺癌生長及血管生成的體內(nèi)研究

2018年06月21日 14:59上海滬震實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量：370

探討毒蕈堿型*受體3(muscarinic cholinergic receptor 3,M3R)拮抗劑4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-diphenylacetoxy-Nmethylpiperidine methiodide,4-DAMP)對裸鼠體內(nèi)小細(xì)胞肺癌生長和血管生成的影響。方法:RT-PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株SBC3中M3R mRNA及蛋白的表達(dá)。建立人小細(xì)胞肺癌SBC3細(xì)胞的裸鼠移植瘤模型,隨機(jī)分為4組,分別腹腔注射0.9%氯化鈉溶液(對照組)和不同劑量(0.5、1和2 mg/kg)的4-DAMP,每天給藥1次,連續(xù)15 d。每2 d測量1次腫瘤體積;給藥結(jié)束后處死裸鼠,測量腫瘤質(zhì)量并計(jì)算抑瘤率。實(shí)時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測各組腫瘤組織中M3R和血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白的表達(dá)水平。免疫組織化學(xué)法檢測VEGF表達(dá)和微血管密度(microvessel density,MVD)。結(jié)果:人小細(xì)胞肺癌SBC3細(xì)胞表達(dá)M3R mRNA及其蛋白。成功建立人SBC3細(xì)胞的裸鼠移植瘤模型,并用不同劑量(0.5~2 mg/kg)的4-DAMP給藥后,發(fā)現(xiàn)裸鼠體內(nèi)移植瘤的體積均比對照組明顯減小(P值均<0.05),剝離腫瘤的質(zhì)量也明顯減少(P值均<0.01),0.5、1和2 mg/kg 4-DAMP給藥組的抑瘤率分別為15.82%、33.50%和55.06%。0.5~2 mg/kg 4-DAMP給藥組腫瘤組織中M3R和VEGF的mRNA及蛋白表達(dá)水平均明顯下調(diào)(P值均<0.05),MVD也明顯下調(diào)(P值均<0.05)。結(jié)論 :M3R拮抗劑4-DAMP可以抑制裸鼠體內(nèi)小細(xì)胞肺癌的生長和新生血管生成。

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