無(wú)菌室建設(shè)的使用與管理
無(wú)菌室的要求
1.工作室應(yīng)矮小、平整,面積只需4米2左右,高2.2—2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無(wú)凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應(yīng)用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌。
2.室內(nèi)采光面積大,從室外應(yīng)能看到室內(nèi)情況。
3.為保證無(wú)菌室的潔凈,無(wú)菌室周圍需設(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無(wú)菌室。
4.無(wú)菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺(tái)以1米為宜 ,其電源開關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
5.無(wú)菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應(yīng)錯(cuò)開,以免空氣對(duì)流造成污染。
6.無(wú)菌室的使用與管理
（1）無(wú)菌室應(yīng)保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放必須的檢驗(yàn)用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測(cè)無(wú)關(guān)的物品
（2） 室內(nèi)檢驗(yàn)用具及凳桌等保持固定位置,不隨便移動(dòng)。
（3）每2—3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺(tái)、門、窗、桌、椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,zui后紫外燈殺菌半小時(shí)
（4）定期檢查室內(nèi)空氣無(wú)菌狀況,細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下,發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí),應(yīng)立即*消毒滅菌。/無(wú)菌室無(wú)菌程度的測(cè)定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養(yǎng)基平板各3個(gè)（平板直徑均9厘米）,置無(wú)菌室各工作位置上,開蓋曝露半小時(shí),然后倒置進(jìn)行培養(yǎng),測(cè)細(xì)菌總數(shù)應(yīng)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí);測(cè)霉菌數(shù)則應(yīng)置27℃溫箱培養(yǎng)5天。細(xì)菌`霉菌總數(shù)均不得超過(guò)10個(gè)為。
（5） 無(wú)菌室殺菌前,應(yīng)將所有物品置于操作之部位（待檢物例外）,然后打開紫外燈殺菌30分鐘,時(shí)間一到,關(guān)閉紫外燈待用
（6） 進(jìn)入無(wú)菌室前,必須于緩沖間更換消毒過(guò)的工作服、工作帽及工作鞋。
（7） 操作應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說(shuō)話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài)。
器材及場(chǎng)所的滅菌消毒
微生物檢驗(yàn)用器材及場(chǎng)所必須進(jìn)行滅菌或消毒處理,不同的對(duì)象采用不同的處理方法
1.高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等,置高壓殺菌鍋內(nèi),一般采用121℃滅菌半小時(shí),當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求,應(yīng)分別處理。
2.火焰滅菌: 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌。
3.高溫干燥滅菌: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160℃滅菌2小時(shí)。
4.一般消毒:無(wú)菌室內(nèi)的凳、工作臺(tái)、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無(wú)法進(jìn)行滅菌,必須用其他方法進(jìn)行消毒處理,采用2%石炭酸或來(lái)蘇兒水溶液擦拭消毒,工作人員的手也用此法進(jìn)行消毒。
5.空氣的消毒: 開啟紫外燈照射30—60分鐘即可。
操作要領(lǐng)
準(zhǔn)備工作
1.*行無(wú)菌室空間的消毒,開啟紫外燈30—60分鐘
2.檢驗(yàn)用的有關(guān)器材, 搬入無(wú)菌室前必須分別進(jìn)會(huì)滅菌消毒
3.操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無(wú)菌工作衣、帽和鞋,才能進(jìn)入無(wú)菌室
4.進(jìn)入無(wú)菌室后再一次消毒手部,然后才進(jìn)行檢驗(yàn)操作
操作過(guò)程注意事項(xiàng)
1.動(dòng)作要輕,不能太快,以免攪動(dòng)空氣增加污染;玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放,以免破損污染環(huán)境
2.操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。
3.接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒,灼燒時(shí)先通過(guò)內(nèi)焰,使殘物烘干后再灼燒滅菌
4.使用吸管時(shí),切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作。
5.觀察平板時(shí)不好 開蓋,如欲沾取菌落檢查時(shí),必需靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能 大開,而是上下蓋適當(dāng)開縫。
6.進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí),應(yīng)使用夾子夾持玻片,切勿用手直接拿玻片,以免造成污染,用過(guò)的玻片也應(yīng)置于消毒液中浸泡消毒,然后再洗滌。
7.工作結(jié)束,收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材,zui后用消毒液擦拭工作臺(tái)。
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