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犬腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒

閱讀:273發(fā)布時(shí)間:2014-12-4

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犬腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。 
80 ng/L  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
40 ng/L  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150µl的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
20 ng/L  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150µl的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
10 ng/L  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150µl的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
5 ng/L  1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150µl的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
 
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl, 
然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 
3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。    
4.  配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 
5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復(fù) 5次,拍干。 
6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。  
7.  溫育:操作同 3。 
8.  洗滌:操作同 5。 
9.  顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘. 
10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 
11.  測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

犬腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒使用目的: 
本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腎上腺素(EPI)含量。


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