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閱讀:314發(fā)布時(shí)間:2014-8-29
兔巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)水平。用純化的
兔巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次
加入巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF),再與 HRP 標(biāo)記的巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)抗體結(jié)合,
形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催
化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細(xì)胞移動(dòng)
抑制因子(MIF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)
算樣品中兔巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)濃度。
:021 60340850 021 60340830 021 60340820
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兔巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)Elisa試劑盒操作步驟
1.
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
90µg/L
5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
45µg/L
4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
22.5µg/L
3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
11.25µg/L
2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5.625µg/L
1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.
溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.
配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復(fù) 5 次,拍干。
6.
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.
溫育:操作同 3。
8.
洗滌:操作同 5。
9.
顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
兔巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人γ氨基丁酸(GABA)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人p物質(zhì)(SP)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人血管活性腸肽(VIP)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人內(nèi)皮脂肪酶(EL)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人胃動(dòng)素(MTL)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人抑制素B(INH-B)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人胰島素受體β(ISR-β)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人褪黑素(MT)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
人*(VC)試劑盒說(shuō)明書,96T/48T供應(yīng)
商鋪:http://www.duty-free.cn/st70965/
主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA試劑盒,科研抗體,細(xì)胞株細(xì)胞系,生物試劑,培養(yǎng)基,動(dòng)物血清
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