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技術(shù)文章

??谔阋呖乖‵MD)Elisa試劑盒分析使用

閱讀:280發(fā)布時間:2013-10-8

牛口蹄疫抗原(FMD)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中??谔阋呖乖‵MD)水平。用純化的??谔阋撸‵MD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入口蹄疫抗原(FMD),再與HRP標(biāo)記的口蹄疫(FMD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的口蹄疫抗原(FMD)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛口蹄疫抗原(FMD)濃度。

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??谔阋呖乖‵MD)Elisa試劑盒標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


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