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技術(shù)文章

常用試劑的配制

閱讀:538發(fā)布時間:2013-4-10

上海 博研科研試劑網(wǎng)為您提供“常用試劑的配制”咨詢??!

 

                                                   常用試劑的配制

 

1、抗體或免疫球蛋白稀釋液0.01mol/L pH7.2PBS

 

 NaH2PO4·2H2O 0.39克
Na2HPO4 1.27克
NaCl 0.85克
NaN3 200mg
H2O(蒸餾水) 至    1000ml

2、ELISA洗液及HRP標(biāo)記抗體稀釋液PH7.4,PBST

 

NaCl 2.0克
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
KCl 0.2克
NaN3 0.2克
H2O 至    1000ml
吐溫(Tween)20 0.5ml
  4°C保存?zhèn)溆?/span>

3、包被液(簡稱CB)pH9.6

 

Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
NaN3 0.2克
H2O 至    1000ml
  密封蓋好,4°C存放備用

4、ELISA底物液(可溶性底物)

 

磷酸-檸檬酸緩沖液pH5.0
0.1mol/L檸檬酸(21.014克/100ml) 24.3ml
0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml) 25.7ml
H2O 50ml
  4°C存放備用

常用試劑的配制5、DAB底物液(不溶性底物,組化病理等)

 

0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL
Tris 6.05克
HCL(36%) 3.15克(約2.7ml濃HCL)
H2O
至                             1000ml
DAB為3´,3´二氧基聯(lián)苯胺,不溶性底物,呈棕紅色

6、DAB溶液配制:(組化及Western blot 顯色)

稱DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL緩沖液100ml溶解,如有沉淀,過濾后使用,一般新鮮配制使用。

用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2濃度為0.01%,混均后使用。

7、3´,3´,5´,5´,-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)溶液配制:

用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或無水乙醇,將TMB配成1%濃度,4°C保存半年以內(nèi)使用。
使用前,用pH5.0磷酸-檸檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul混勻后立即使用。

2N H2SO4終止后,450nm測定OD值。

8、1%離子瓊脂膠配制液

作免疫雙相擴(kuò)散,單相擴(kuò)散及免疫電泳中使用。

0.05UpH8.6巴比妥鈉-HCL緩沖液

 

巴比妥鈉 23.8克
1mol/L HCL 34.5ml
H2O 2150ml


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